简介
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合，在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。
(1)灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有 DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3)仅需约2-3个小时即可完成。
(4)可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
(5) 实测效果好
包装清单
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
BEENbio-CR023-1 | TdT酶 | 100μl |
BEENbio-CR023-2 | Biotin-dUTP | 900μl |
BEENbio-CR023-3 | TdT酶稀释液(选用) | 500μl |
BEENbio-CR023-4 | Streptavidin-HRP | 22μl |
BEENbio-CR023-5 | Streptavidin-HRP稀释液 | 1ml |
BEENbio-CR023-6 | DAB显色液 | A 6ml |
BEENbio-CR023-7 | DAB显色液 | B 6ml |
BEENbio-CR023-8 | 标记反应终止液 | 6ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件
-20℃保存，DAB显色液A和DAB显色液B需避光保存。
注意事项
需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)等适当的封片液，用于固定的4%多聚甲醛或向BEENbio订购免疫染色固定液(P0098)，同时需自备含0.3% Triton X-100的PBS或向BEENbio订购免疫染色强力通透液(P0097)。需自备过氧化氢。
如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K和二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向BEENbio订购。
DAB对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品*于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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