检测食品中伏马毒素酶联免疫检测试剂盒

检测食品中伏马毒素酶联免疫检测试剂盒

检测食品中伏马毒素酶联免疫检测试剂盒

1 原理及用途

伏马毒素(Fumonisins)是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素，目前已知有28种衍生物，其中以伏马毒素B1（FB1）zui为普遍，研究也zui为深入，现已发现玉米及其制品，如动物饲料均易被FB1造成污染。FB1毒性在伏马毒素中zui强，对多种动物有较严重的毒理作用。研究表明FB1可引发马的白脑软化症，猪的肺水肿综合症，此外，还可诱发人类的食道癌和肝癌、胃癌等疾病，对畜牧业和人类的健康构成危害。

试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的伏马毒素B1和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗伏马毒素B1抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含伏马毒素B1含量成负相关，与标准曲线比较乘以样本稀释倍数即可得出样本中伏马毒素B1的残留量。

2 技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.5ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：25℃，30min～15min

2.3 检测下限：

玉米、饲料…………………………50ppb

食用油………………………………10ppb

2.4 交叉反应率：

伏马毒素B1…………………………100%

 2.5 样本回收率：

饲料…………………………………95±15%

玉米…………………………………100±15%

食用油………………………………85±15%

3 试剂盒组成

酶标板……………………………96孔

标准液（黑盖）：各1ml

0ppb、0.5ppb、1.5 ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb

酶标记物（红盖）…………………5.5ml

抗体工作液（蓝盖）………………5.5ml

底物液A（白盖）……………………6ml

底物液B（黑盖）……………………6ml

终止液（黄盖）………………………6ml

10X浓缩复溶液（黄盖）……………50ml

20X浓缩洗涤液（白盖）……………40ml

说明书………………………………1份

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 试剂：甲醇

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：样本提取液

70%甲醇，即V甲醇:V去离子水=7：3。

配液2：复溶液

将10×浓缩复溶液用去离子水10倍稀释（1份10×浓缩复溶液加9份去离子水），复溶液在4℃环境可保存一个月。

配液3：1×工作洗涤液

将浓缩洗涤液20倍稀释(1份洗涤液加19份去离子水)。

5.3 样本前处理步骤：

5.3.1 玉米、饲料处理方法

1）称取1g粉碎样品于50ml离心管中，加5ml样品提取液，振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；

2）取上清0.1ml，加入1.9ml复溶液，振荡2分钟；

3）取50μl进行分析。

样本稀释倍数：100   检测下限：50ppb

（若样本中伏马毒素B1的含量较高，可在步骤2）按比例增大稀释倍数，检测出的含量乘以样本实际的稀释倍数即为样本中的含量）

5.3.1 食用油处理方法

1）称取5ml样品于50ml离心管中，加8ml正己烷和5ml样品提取液，振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；

2）去除上层液体，取100ul下层液体加入1.9ml复溶液，混匀；

3）取50μl进行分析。