低速离心机如何检验新型非洲猪瘟？卢湘仪为你解答！

2019年07月24日 16:45:35来源：制药站编辑：阿多点击量：42626

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　　【制药站技术文章】俗话说，“猪粮安天下”，生猪产业是关系国计民生的重点产业。经过一年的努力，目前我国非洲猪瘟疫情势头总体减缓，养猪场户信心逐步增强，接下来将以非洲猪瘟疫情防控和恢复生猪生产为重点任务。而在非洲猪瘟疫情防控、非洲猪瘟实验室检测工作的过程中，低速离心机等检测仪器设备将受到高度的关注。

　　在低速离心机的使用过程中，如何正确操作是关键。对此，上海卢湘仪对检验新型非洲猪瘟的操作步骤，包括检测前准备工作、实验所需自备试验器材、新型非洲猪瘟检验仪样本处理及要求、新型非洲猪瘟检验仪操作步骤进行了解答。

上海卢湘仪离心机

　　检测前准备工作

　　1、请提前20分钟从冰箱中取出新型非洲猪瘟检验仪试剂盒，平衡至室温。

　　2、从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃。

　　3、需要做20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

　　实验所需自备试验器材

　　1.新型非洲猪瘟检验仪(450nm)

　　1.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

　　3.准备37℃恒温箱或水浴锅

　　4.蒸馏水或去离子水

　　新型非洲猪瘟检验仪样本处理及要求

　　1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3.新型非洲猪瘟检验仪尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5.新型非洲猪瘟检验仪组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

　　7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

　　新型非洲猪瘟检验仪操作步骤

　　1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2.设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL。

　　3.待测样本孔加待测样本10μL，样本稀释液40μL。

　　4.随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入新型非洲猪瘟检验仪辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满新型非洲猪瘟检验仪洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴锅孵育15min。

　　7.每孔加入终止液50μL，15min内，在新型非洲猪瘟检验仪450nm波长处测定各孔的OD值。

　　作为在美国获得FDA认证的中国离心机企业，上海卢湘仪目前已经通过了ISO9001：2015质量体系认证和ISO13485：2003质量体系认证以及CE认证，企业从设备的生产制造、销售、到售后服务形了完整体系，旗下离心机产品更是出口到美国、德国、英国、加拿大、泰国等30多个国家。“不断创新，面向未来”是卢湘仪追求的目标，企业将竭尽全力，向用户提供高质量的产品和服务，并愿与国内外企业建立广泛的技术合作关系！

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