细胞简介
人胚肾细胞株293插入SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞最初的名字293tsA1609neo,携带SV40复制序列,被广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。
运输和保存
1.1 mL冻存管包装干冰运输,收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。若发现干冰已经挥发干净、冻存管盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.T25瓶培养的细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
培养信息
细胞名称 | 293T,HEK-293T,人胚肾细胞 |
别称 | Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo |
种属来源 | Homo sapiens, human |
组织来源 | kidney; Embryo |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1级 |
传代比例 | 1:3-1:5 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长培养基 | 10% FBS、高糖DMEM、1% Penicillin-Streptomycin |
培养条件 | 气相:95% 空气、5% CO2;温度:37℃ |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO;液氮 |
支原体检测 | 阴性 |
STR鉴定结果 | D5S818: 8,9 D13S317: 12,14 D7S820: 11 D16S539: 9,13 vWA: 16,19 THO1: 7,9.3 Amelogenin: X TPOX: 11 CSF1PO: 11,12 |
培养注意事项
1.293T贴壁能力较弱,加液、换液、洗涤时,须动作轻柔,避免用液体直冲细胞,会造成细胞脱落。细胞生长不能过密,过密细胞容易脱落,脱落下来的细胞可以通过离心收集,消化后继续培养。
2.293T细胞状态直接影响病毒包装效率。当细胞传代次数过多、细胞增殖速度减缓、细胞贴壁能力非常弱(轻柔换液也能导致细胞半数脱落)时,说明细胞状态不好,会大幅降低病毒包装效率。
3.使用高糖DMEM培养293T,低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培养基可能影响293T细胞的生长状态。
4.如果发生293T细胞不贴壁,漂浮在培养基中的现象,请确认所使用的DMEM中 NaHCO₃浓度及培养箱中CO2浓度。并参考以下培养体系:
① DMEM由1.5 g/L NaHCO₃ 配制而成,使用5% CO2培养箱。
② DMEM由3.7 g/L NaHCO₃配制而成,使用10% CO2培养箱。
当使用 NaHCO₃含量高的培养基时,必须将这些细胞在10% CO2中孵育,以便正确缓冲培养基。当培养基没有适当缓冲时,293T细胞虽然可以存活,但将无法粘附并保持漂浮在培养基中。
5.培养时可酌情使用预铺0.2%明胶的培养瓶/培养皿,若细胞状态好,可省略此步骤。
6.本细胞仅用于科学研究,不得用于临床治疗。
7.请注意无菌操作,避免污染。
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