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上海源叶生物科技有限公司>技术文章>碘化丙啶染色

技术文章

碘化丙啶染色

阅读:657          发布时间:2014-7-3

 1.原理  碘化丙啶(propidium iodide,PI)不能穿人完整的活细胞膜中,即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染,而坏死细胞 由于失去膜的完整性,PI可进入细胞内与DNA结合,根据此特点,使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定,以增加细胞膜对染料的通透性。

 

    2.溶液配制  使用0.01mol/LPBS(pH 7.4)配制终浓度为0.5mg/ml的PI工作液。

 

    3.染色程序

    (1)单层细胞培养标本经预冷70%乙醇固定1小时,4℃;

    (2)0.01mol/LPBS(pH 7.4)冲洗;

    (3)沥干后加入PI工作液,室温孵育15分钟;

    (4)冲洗后封片。

 

    结果:PIzui大激发波长和zui大发射波长分别为488nm和630nm,荧光显微镜观察,DNA呈红色荧光。

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