中药多糖的提取、分离纯化及分析方法的进展

中药多糖的提取、分离纯化及分析方法的进展

1  中药多糖的提取

1.1　传统提取方法

　 中药多糖常规的提取方法多采用热水、酸、碱、乙醇等溶剂进行浸提，如水提醇沉法、酸碱提取法、索氏提取法等作为经典的传统提取工艺，在中草药有效成分的提取过程中应用广泛。

2　中药多糖的分离

2.1  除蛋白质

2.1.1　 Sevag法

　 利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取液与Sevag试剂（氯仿:戊醇或正丁醇以4:1或5:1比例混合）按一定比例混合，通过离心除去介于提取液与Sevag试剂交界处的变性蛋白质。夏泉等利用Sevag法除去黄芪粗多糖中的蛋白质成分，经6次处理后，黄芪粗多糖冻干粉中的蛋白质含量下降70.8%，而多糖的含量仅下降4.44%。

3.1.3　 金属络合物法

　 作为沉淀剂沉淀法中的一种，其基本原理是溶度积规律，根据多糖能与铜、钡、钙、铅离子形成难溶性的络合物沉淀，从溶液中沉淀析出的方法。得到的络合物沉淀用5%无机酸乙醇溶液或硫化氢分解。

3.1.4　 盐析法

　 根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同，在中药水提溶液加无机盐（常用的盐析剂有硫酸铵、氯化钠、氯化钾等，以硫酸铵*）至一定浓度或达到饱和时，可使有些物质溶解度降低，甚至沉淀析出，达到与水溶性杂质分离的目的。

　 亲和层析（AE）是根据生物大分子与某些对应的专一分子特异性的、可逆性的亲和结合作用而建立的一种层析技术。

　 江咏等通过静态吸附的方法对巴戟天粗多糖在Con A Sephorose 4B亲和填料上的吸附和脱附情况进行研究，确定其*吸附条件为：pH7.5，NaCl浓度0.1 mol/L；*脱附条件为：pH6.5，α-D-甲基葡萄糖苷浓度0.02 mol/L。在此条件下，巴戟天粗多糖被分离为MOP-A1和MOP-A2两个组分，占进样总糖量的44.8％。

3.2.2无菌制剂设备（非zui终灭菌的注射剂）

　　无菌粉针、水针生产线设备；混粉、筛粉机，灯检机；冻干机，配料、过滤设备等

3.2.3无菌制剂设备（可zui终灭菌的注射剂）干

　　浓配罐、稀配罐及其输送系统；洗、烘、灌、封机组及包装机；灭菌柜，灯检机，包装机等。

3.2.4液体眼用制剂设备

　　配液罐及输送系统；过滤器、灭菌柜、灌装机；灯检机，包装设备等。

3.2.5固体口服制剂设备

　　粉碎、混合、制粒、整粒、干燥设备；压片、充填、包衣设备；软胶囊制备生产线；干燥、筛选、灭菌、内包装设备等。

3.2.6液体口服制剂设备

　　配料、灭菌、过滤设备；洗瓶、灌装、封口设备；内包装设备等。

3.2.7生物制品与血液制品设备

　　配制及物料输送系统；生物反应器（发酵罐、培养罐）；分离、纯化设备，离心、膜分离设备；灌装机，冻干机，轧盖机等。

3.2.8中药制剂设备

　　提取、浓缩系统，粉碎、灭菌设备；筛选设备，干燥混合设备；药丸制备设备，片剂、胶囊、颗粒剂制备设备。

 

4.2.3 二项主要审核内容

　　（1）审核供应商的技术条件与制造能力，审核FAT、SAT、验收测试报告；

　　（2）审核设备、工程系统的DQ、IQ、OQ、PQ文件。

4.2.4 质量*人的一票否决权

　　行使否决权的条件。若供应商的设备有下列条件情况发生时即可对其否决：

　　（1）不符合新版GMP规范；

　　（2）不能满足生产工艺的要求；

　　（3）对药品会产生或可能产生污染的设备；

　　（4）结构设计不合理，不能方便地验证，关键工艺参数不能显示或自动记录的设备；

　　（5）不符合安全要求及其它国家规范的设备；

　　（6）在市场上属于技术落后或淘汰设备；

　　（7）能耗大，污染环境的设备。

　　做到符合用户产能要求并留有余地，安全到位不逾矩、不违规。只有做好这些工作才能称得上一家合格的符合新版GMP规范要求的设备制造企业。