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超声波提取法可提高黄酮的得率的实验

时间:2012/12/26阅读:7858
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  超声波法提取柿叶总黄酮。工艺流程:柿叶y粉碎y乙醇浸泡y超声处理y离心y定容y测定。单因素实验。1乙醇浓度对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2.0g,共6份,按料液比1B25,分别加入40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇,浸泡1h,超声提取30min,提取液离心(4000r/min)10min,用少量70%乙醇洗涤药渣后,离心5min.合并离心液置100ml容量瓶,加乙醇溶液定容,取0.5ml提取液按/1.2.20方法进行显色反应,在510nm处测定吸光值。o料液比对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2.000g,共4份,按料液比1B10,1B15,1B20,1B25分别加入70%乙醇,以下操作同1.?提取时间对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2.000g,共4份,料液比1B25,浸泡1h后按选择的提取时间15、30、45、60min进行超声提取,以下操作同1.正交实验。根据以上单因素实验结果,选择对实验影响较大的3个因素各设置3水平,采用L9(33)正交实验,以确定柿叶总黄酮物质的*提取条件。常规回流法提取柿叶总黄酮测定吸光值为0.092,经计算得总黄酮得率为2.00%。
  
  超声波提取法单因素实验结果:乙醇浓度对超声波提取的影响。表明,随乙醇浓度的增大,柿叶总黄酮的提取率也随之增高;当乙醇浓度超过60%时,随乙醇浓度的增高,柿叶总黄酮的提取率反而下降。这可能是由于随乙醇浓度的增大,提取液中除黄酮外的其他物质的提取率也随之提高,从而影响黄酮类物质的提取,造成柿叶总黄酮的提取率下降。料液比对超声波提取的影响。由可知,柿叶总黄酮提取率随料液比的增大而迅速增大;当料液比达到1B20时,总黄酮提取率的增加幅度明显减缓。
  
  提取时间对超声波法提取的影响。由可知,总黄酮提取率随超声时间的增加而呈上升趋势,但增加的趋势不很明显,特别是当提取时间达到45min以上时,提取率基本无变化。料液比对超声波提取的影响提取时间对超声波提取的影响2.3正交实验结果正交实验表明(,2),影响柿叶黄酮类化合物提取率因素的顺序为:B(料液比)>C(提取时间)>A(乙醇浓度),即料液比是影响柿叶总黄酮提取率的zui重要因素。从平均提取得率K值来看,以提取条件A3B3C3为*提取工艺,即乙醇浓度60%,超声45min,料液比1:25。
  
  正交实验结果实验号乙醇浓度A料液比B提取时间C空白总黄酮得率M%11.4432121.6363133.042421232.13752321.77162312.156731322.81183232.3869312.464K12.0402.1302.021-K22.0211.9252.0472.073-K32.5412.5542.5412.516-R0.5200.5290.5200.495-2.4验证实验称取柿叶干粉2.000g,以料液比1B25加入60%的乙醇,浸泡1h,进行超声波提取45min,提取液离心(4000r/min)10min,用少量70%乙醇洗涤药渣后,再次离心15min.合并离心液置100ml容量瓶,加乙醇溶液定容。取0.5ml提取液按/1.2.20项进行显色反应,在510nm处测吸光值OD=0.172,柿叶总黄酮得率为3.54%,与正交实验分析结果相符。
  
  超声波提取法与常规回流法比较由可知,超声波法柿叶总黄酮的提取得率提高77%,缩短提取时间195min,料液比(提取溶剂用量)降低一半。
  
  超声波提取法与常规回流提取法情况对比提取方法时间Mmin料液比提取率M%常规回流法2401B552.00超声波提取法451B25超声波提取柿叶黄酮的*工艺条件是A3B3C3,即乙醇浓度60%,超声时间45min,料液比1B25.与常规回流法相比,超声波提取法可提高柿叶总黄酮得率77%,并且可大幅度缩短提取时间,降低提取溶剂的用量。因此,超声波提取法具有提取效率高、成本低的明显优势。

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