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木质素含量测定说明书-齐一生物
2018-10-22 阅读(1950)
木质素（Lignin）含量试剂盒说明书
For Research Use Only
仅供研究用
货号：QYS-237008
分光光度法 50 管/48样
齐一生物提供木质素测定及木质素单体检测服务
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
木质素是构成植物细胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇构成的一类物质，存在于木质组压作用。
测定原理
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在 280nm 处有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低与木质素含量正相关。
需自备的仪器和用品
天平、40 目筛，玻璃试管、烧杯、离心机，恒温水浴锅、烘箱、封口膜、紫外分光光度计、 1mL 石英比色皿、高氯酸，浓硫酸。
试剂组成和配制
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理
样品 80℃烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，称取约 5mg（记为 W）于 10mL 玻璃试管中（务*玻璃试管，不可用 Ep 管）
计算公式
标准曲线：y =0.02776x+0.0068，R2=0.9889
Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.02776×V 反总×10-3÷W×T
=0.0735×(ΔA-0.0068) ÷W×T
V 反总：反应总体积：2.04mL；W：样本质量，g；T：稀释倍数
注意事项
- 试剂一有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。
- 加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人生伤害。
- 试剂三具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作。
- 取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度，试剂三的用量可调整，保证吸光值在
0.1-0.8 之间即可，并在公式中参与计算。
- 乙酰化测定木质素含量如受到实验环境的影响，可自行制作标准曲线。
