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上海现货小鼠白细胞介素35（IL-35）ELISA试剂盒elisa技术流程
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性.在测定时,受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应.用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开.再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上.此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例.加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析.由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度.ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体.
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点.
试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测.先将生物素标记的抗体同时温育.洗涤后,加入亲和素标记过的HRP.再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用.产生颜色.颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系.
原理
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等.以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备.近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现.
HBsAg试剂特点（检测模式：临床抗体夹心法）：包被抗体为山羊多抗.多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性.酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性（99.98%）提高检测的灵敏度,应用ParlEhrich学说（PEI）HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3.将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗体,这些抗体就会与HEV的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份.然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与*次孵育结合上的HEVIgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEVIgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长:450nm处测量O.D.值,按照本HEVIgM抗体elisa试剂盒的测试标准,O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性.