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ELISA试剂盒操作步骤
ELISA试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀.不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差.
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数.每个标准品和空白孔建议做复孔.每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔.标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内.
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内.立即加入50ul的生物素标记的抗体.盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟.避免光照.
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果.
在450nm波长处测定各孔的OD值.
ELISA操作步骤
现货供应小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒酶联免疫吸附实验材料,试剂,溶液
1．酶标板,100μltip头,1mlEp管,湿盒
2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH9.6）
碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水100ml,调pH9.6
3.封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗涤液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,叠氮钠0.01g,加双蒸水100ml,调pH7.4
5.样本稀释液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,叠氮钠0.01g,加双蒸水100ml,调pH7.4
6.酶标第2抗体(羊抗兔)稀释范围1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-过氧化氢尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,无水乙醇10ml,加双蒸水100ml.
②底物液B(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,柠檬酸0.933g,0.75%过氧化氢尿素0.64ml,加三蒸水100ml,调pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-过氧化氢尿素溶液.
8.终止液(2mol/LH2SO4溶液)双蒸水200ml,浓硫酸34ml,(缓慢滴加并不断搅拌),加双蒸水300ml小鼠胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒 
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