植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒

性能:

1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2．灵敏度：zui低检测浓度小于10 pg/ml。

3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

 植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 

释。 

48μmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 

24μmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液 

12μmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液 

6μmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液 

3μmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液 

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl， 

然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 

量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 

4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此 

重复5 次，拍干。 

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 

7. 温育：操作同3。 

8. 洗涤：操作同5。 

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 

10 分钟. 

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 

液后15 分钟以内进行。 

 植物前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒

标本要求 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 

2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 

3.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 

4.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 

5.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 

6.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 

7.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 

组成 

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶 

2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（96μmol/L） 0.5ml×1 瓶 

3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 

4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份 

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张 

6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个 

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