| 上海雷浩信息科技有限公司
主营产品： abcam抗体,cst抗体,bd抗体,胎牛血清,bd基质胶,感受态细胞,四季青胎牛血清 |
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2015-12-23 阅读(851)
转化效率是感受态细胞的一项评价指标,下文即感受态细胞转化效率的检验方法.
为确定 感受态细胞 的转化效率,可将一定量的完整 质粒 转化到感受态细胞中,取一部分转化的 细菌 ,涂布到选择培养基上,可用菌落生长单位/μg DNA ,按下面的方法计算感受态细胞的转化效率.计算公式：转化效率＝产生菌落的总数/铺板DNA的总量.
例如,取1μl(0.1 ng/μl)完整的质粒转化100μl的感受态细胞. 向转化反应液中加入900μl 培养液 ,让细菌恢复一小段时间,取100μl铺板.培养过夜,产生1000个菌落.转化0.1 ng DNA,用SOC稀释到1000μl后,取1/10涂平板,则涂平板共用0.01 ng DNA 质粒,所以转化率＝1000克隆/0.01 ng DNA =105 cfu/ng=108 cfu/μg.
转化效率1×10 6 cfu/μg DNA可满足普通的亚克隆实验；1×10 7 cfu/μg DNA用于作更复杂的亚克隆,有*的DNA的转化,T-克隆实验；构建文库和 突变 要求用的转化的效率为>1×10 8 cfu/μg DNA.
