要使酶联免疫吸附剂测定测定得到准确的结果，不论是定性的还是定量的，必须严格按照规定的方法制备试剂和实施测定。主要试剂的制备要点，如包被缓冲液、洗涤液、标本稀释液、结合物稀释液、底物工作液和酶反应终止液等，配制时不可掉以轻心。缓冲液可于冰箱中短期保存，使用前应观察是否变质。蒸馏水的质量在酶联免疫吸附剂测定中也至关重要，使用新鲜重蒸馏的。不合格的蒸馏水可使空白值升高。
加样、保温、洗涤这三个步骤的正确性是标准化操作的前提条件。
1、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒加样应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。
2、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒在酶联免疫吸附剂测定中一般有二次抗原抗体反应，即加标本后和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器是水浴箱，可使温度迅速平衡。各酶联免疫吸附剂测定板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。
3、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒洗涤在酶联免疫吸附剂测定过程中不是反应聚，但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯待塑料对蛋白质的吸附作用是普遍性的。因此在酶联免疫吸附剂测定测定的反应过程中应尽量避免非特异性吸附，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。
