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可见分光光度计

阅读:1249          发布时间:2019-4-1

       随着科学技术的发展和精密仪器制造的进步, 分光光度计的性能也在不断化与完善。 分光光度计是将成分复杂的光分解为光谱线的仪器, 其测量范围包括波长 在 200~380 nm 的紫外光区以及波长在 380~780 nm 的可 见光区。 可见分光光度计具有灵敏度高、 适用范围广、 准确度高、 结构紧凑、 价格低、 操作简便、 取样少以及 抗干扰性能越的势, 因此得到了十分广泛的应用。 通过应用分光光度计, 可对样品进行定性分析、 定量分 析。 定量分析即测定某溶液中某物质的浓度, 定性分析 即根据测定的某物质在不同波长的吸收光的峰值对该物 质进行定性。 不同光源均有自身的发射光谱, 所 以, 可以应用不同发光体作为分光光度计的光源, 其 中, 钨灯所发波长范围在 380~780 nm 的光, 经过三棱 镜折射之后, 能够得到由红橙黄绿蓝靛紫构成的连续光谱, 可以作为可见分光光度计的光源。

       可见分光光度计的发展趋势 可见分光光度计是一种精密的光谱化学分析设备, 具有精度高、 检测限低、 价格低等特点, 可进行定量测 量、 动力学测试、 OD 值直接测量、 光谱扫描、 多波长 测试以及食品安全检测、 总磷总氮检测、 重金属检测、 DNA-蛋白质检测、 农残留检测等 [1]。 因此, 可见分 光光度计在日用化工、 食品制造、 饮料制造等领域得到 了广泛应用。 由此可见, 可见分光光度计有着良好的应 用前景, 市场需求较大。 目前, 较为常见的分光光度计主要包括紫光可见分 光光度计、 红外分光光度计、 荧光分光光度计以及原子 吸收分光光度计。 从分光光度计的组件方面来看, 机刻 光栅正在迅速被全息光栅所取代; 从分光光度计的构型 方面来看, 微处理机控制的分光光度计逐渐取代手控单 光束、 双光束自动记录构型的分光光度计; 双波长分光光度计、 快速扫描分光光度计等新兴分光光度计正在迅 速发展。 在当今的信息社会化、 社会信息化时代背景 下, 实现可见分光光度计与计算机技术、 信息技术、 智 能技术等新兴技术的有机结合, 提高可见分光光度计的 智能化水平、 自动化程度, 确保可见分光光度计能够保 持工作状态, 预防人为操作误差的出现, 从而可以 使可见分光光度计检测结果的准确性、 可靠性得到显著 提高。 现阶段, 提高可见分光光度计的智能化水平、 自 动化程度, 是可见分光光度计的主要发展方向。 2 可见分光光度计的结构原理 2.1 可见分光光度计的工作原理 对于分光光度计, 其工作原理是, 在光的照射下, 溶液中的物质产生了对光的选择性吸收效应。 不同的物 质, 其吸收光谱也有所不同, 所以, 在某单色光通过溶 液的时候, 其能量被吸收而减弱, 物质的浓度与光能量 的减弱程度之间存在的比例关系, 也就是朗伯比尔 定律: T=I/I0 A=KCL log (I0/I) =KCL 式中: T—— —透射比; I0—— —入射光强度; I—— —透射光强度; A—— —吸光度; K—— —吸收系数; C—— —溶液浓度; L—— —溶液光路长度 [2]。 由朗伯比尔定律可以看出, 在溶液光路长度 L、 吸 收系数 K 以及入射光强度 I0 保持不变的情况下, 溶液浓度 C 和透射光强度 I 成比例。

2.2 可见分光光度计的结构原理 在可见分光光度计的使用过程中, 被测溶液被某单 色光透过之后, 光电池接收该单色光, 并将其转换为电 信号 PD, 经前置放大器放大。 360~800 nm 光谱区域内 的基准信号不同, 根据不同的基准信号, 单片机的微处 理器转换器发出指令, 改变前置放大器的放大倍数, 至 基准信号达到单片机微处理器程序要求为止。 基准信号 进入模数转换器, 转换为数字信号, 传送给单片机, 然 后进行数据处理。

      可见分光光度计的误差来源 波长准确度是可见分光光度计的主要计量指标, 其 指的是指示波长、 实际波长两者之间的符合程度, 基于 此, 波长示值误差对可见分光光度计的测量度有直 接影响。 虽然朗伯比尔定律是可见分光光度计的基本原 理与理论依据, 但只在应用单一波长的基础上, 该定律 才成立。 在可见分光光度计的实际应用中, 若操作不当 或不够注意, 便会受到杂散光的影响。 杂散光指的是投 射在光检测仪器上不同于设定波长的光的总和。 杂散光 所带来的误差与其数量基本相同 [3], 即, 若可见分光光 度计的杂散光为 1%, 则其导致的误差也为 1%左右。 产 生杂散光的原因一是光学元件受到水珠、 霉斑或者灰尘 的污染; 二是出现了漏光, 使得复合光混入; 三是光学 元件发生损坏或者是位置出现改变等。 基线平直度也是可见分光光度计的主要计量指标, 其指的是可见分光光度计的全波段, 每一波长点的光度 噪声。 基线平直度、 漂移以及噪声结合, 能够反映可见 分光光度计的综合性能。 其中, 漂移指的是可见分光光 度计在 500 nm 处与时间有关的光度变化量; 噪声指的 是可见分光光度计在 250 nm、 500 nm 处的光度噪声。 基线平直度差, 有可能导致图谱扫描变形或是出现伪 峰, 给可见分光光度计的测量结果带来较大误差。 4 可见分光光度计的日常维护及保养

(1) 应将可见分光光度计设备安装在光源室, 并要 及时清洁密封窗、 反射镜、 透镜等光学元件, 不可用手 触摸。 应避免光电转换元件受潮积尘、 强光照射, 不可 长时间暴光 [4]。 定期更换干燥剂, 避免单色器盒的色散 元件受潮。 仪器使用完毕或者是暂停使用时, 用防尘套 罩住, 并放置防潮硅胶, 避免其受潮发霉。 对于反射 镜、 透镜上的灰尘, 应使用吹气球吹除; 而手指印及其他杂质, 则需用擦镜纸擦拭; 污染严重时, 则需更换新 的反射镜、 透镜。

(2) 为了延长可见分光光度计光源的寿命, 在日常 使用该仪器的过程中, 应尽可能地减少开关仪器的次 数。 若光源亮度明显减弱或者不稳定, 则需及时更换新 的光源。 光源关闭后, 不可立即重新开启; 如果两次测 量之间的时间间隔较短, 可以不关灯。

(3) 分光系统是可见分光光度计中主要的光学元 件, 对其洁净度、 精度的要求*, 切忌将密封机罩随 意打开; 必须打开时, 则需人员操作, 以避免分光 系统受损。

(4) 根据操作规范的要求, 正确使用吸收池, 对吸 收池的光学面进行仔细保护。 若是吸收池上遭受有色物 质的污染, 可使用 3 mol/L 的乙醇和 3 mol/L 的氯化氢混 合液进行洗涤。 切忌在电炉或火焰上对吸收池进行烘 烤、 加热。

(5) 若是供电电源的电压波动较大, 则需给可见分 光光度计配备稳压器, 给予其的过压保护; 对长期 不用的可见分光光度计, 应定期通电 20~30 min, 以确 保其正常使用。 (6) 定期根据 JJG 178—2007 等相关标准中的要 求, 检定、 校准可见分光光度计, 确保其测量结果的可靠 性。

      可见分光光度计是一种集电子技术、 紧密机械及光 学科技为一体的理化分析仪器, 有着广阔的发展空间。 可见分光光度计在实际应用中, 会受到波长准确度、 基 线平直度等方面误差的影响, 为此, 应在日常使用过程 中加强对可见分光光度计的维护与保养, 确保可见分光 光度计的作用能够得到充分发挥。

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