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定氮仪的应用原理

2021-01-08标签:消化管, 定氮仪, 中

    定氮仪检测样品蛋白质含量分为以下步骤:

    第一步:消化/消解(将有机物样品转化为无机物)

    1、准备消化管(根据消解仪的工位数来定),标号。1、2、3号消化管中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到消化管底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾硫酸铜<接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测定进行校正。4、5、6号消化管中加入蒸馏水1.0mL代替样液,其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。

    2、将加好试剂的各消化管放置消化架上,接好抽气装置。用控温方式分段加热,此时消化管内物质炭化变黑,并产生大量泡沫,务必注意防止气泡冲出管口。待泡沫消失停止产生后,加大火力,保持消化管内液体微沸,至溶液澄清后,再继续加热使消化液微沸15min。消化时放出的气体内含SO2,具有强烈刺激性,因此自始自终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出。整个消化过程均应在通风橱中进行。消化完全后,关闭加热装置,使消化管冷却至室温。

    第二步:蒸馏和吸收蒸馏和吸收是在微量定氮仪内完成。

    蒸馏这个动作也是非常关键的,加热蒸馏的过程中,加酸、加碱、加稀释液目前市场上都是自动完成的,特备注意的是碱液一定要过量,原因是碱液与消解后的样品酸液完全反应,否则测试数据是不正确的。

    第三步:滴定,蒸馏收集结束后,就是滴定。

    方法有两种:
    1、是用半自动定氮仪,手动滴定,肉眼观察滴定的终点颜色的变化,确定滴定完成,计算出氮含量,然后通过样品的转化系数,求取蛋白质样品的含量。

    2、全自动定氮仪,通过光学颜色传感技术,定氮仪边蒸馏边滴定的方式,自动计算结果,打印结果。

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