构巢曲霉PCR检测试剂盒说明书

运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
以下是构巢曲霉PCR检测试剂盒说明书的相关产品：

木瓜（贴梗海棠） 英文名称：Quince (Chaenomeles speciosa) 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

马鞭草 英文名称：Verbena 规格：：2g 保存：：-20℃，避光

小檗皮 英文名称：Barberry bark 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

川贝母 英文名称：Fritillaria cirrhosa 规格：：2g 保存：：-20℃，避光

八角茴香 英文名称：Star anise 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

黄精(滇黄精) 英文名称：Huang Jing (Yunnan Huang Jing) 规格：：2g 保存：：-20℃，避光

西洋参 英文名称：American ginseng 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

番泻叶 英文名称：Senna 规格：：0.5g 保存：：-20℃，避光

野菊花 英文名称：Wild chrysanthemum 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

射干 英文名称：Belamcanda chinensis 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

夏枯草 英文名称：Xia Kucao 规格：：1g 保存：：-20℃，避光

柴胡 英文名称：Bupleurum 规格：：0.5g 保存：：-20℃，避光

刺五加 英文名称：Acanthopanax senticosus 规格：：5g 保存：：-20℃，避光

苦地丁 英文名称：Corydalis 规格：：0.5g 保存：：-20℃，避光

构巢曲霉PCR检测试剂盒说明书豚鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit  Guinea Pig Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit

大鼠活化素A受体抗体(IgG)(ACV-RAb(IgG))ELISA Kit  Rat anti-Activin A receptor antibody(IgG),ACV-RAb IgG ELISA Kit

牛γ氨基丁酸(GABA)ELISA Kit  Bovine Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit

人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)ELISA Kit  Human enterovirus 71 virus(EV71)antibody(gM)ELISA kit

鹿尿酸氧化酶ELISA Kit  Deer Urateoxidase ELISA kit

人内皮细胞特异分子-1(ESM-1)ELISA Kit  Human endothelial cell-specific molecule 1,ESM-1 ELISA Kit

大鼠细胞色素P450 3A4(CYP3A4)ELISA Kit  Rat Cytochrome P450 3A4,CYP3A4 ELISA Kit

小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA Kit  Mouse Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit

人脱氧皮质酮(DOC)ELISA Kit  Human Deoxycorticosterone,DOC ELISA Kit

人  状瘤病毒抗体ELISA Kit  Human papillomavirus antibody ELISA Kit

小鼠凋亡相关因子配体(FASL)ELISA Kit  Mouse Factor-related Apoptosis ligand,FASL ELISA Kit

小鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA Kit  Mouse fibroblast growth factor 9(glia-activating factor)(FGF9)ELISA kit

人  ELISA Kit  Human Cortisone ELISA Kit

牛甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA Kit  Bovine Thyroxine-Binding Globulin,TBG ELISA Kit

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。