脱氧核糖核酸酶I(牛胰)Sigma
脱氧核糖核酸酶I(牛胰)Sigma
产品描述
Application
Sigma公司的DNAse I与人类尿液来源的白细胞介素1抑制剂相比,具有水解[14C]DNA [14C]的能力。它也被用来切割139个碱基对Hind III/Nci I限制性片段,以研究该酶用于足迹实验的稳定性。DNase I被广泛用作研究药物和蛋白质与DNA结合的印迹剂。
已有研究采用牛胰腺脱氧核糖核酸酶I,研究了从牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的一个新途径。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于研究鲤鱼肝脏DNase的分离和进一步的特性。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
Biochem/physiol Actions
DNase I是一种核酸内切酶,作用于嘧啶附近的磷酸二酯键,产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg2+存在时,DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解,裂解位点是随机的。在Mn2+存在下,两条DNA链几乎在同一位点被裂解。二价阳离子,如Mn2+、Ca2+、Co2+和Zn2+是该酶的激活剂。浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成,摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。
Unit Definition
一个Kunitz单位可以DNA、I型或III型作为底物,在25°C的pH 5.0条件下每分钟每毫升产生0.001的ΔA260 。
Physical form
含氯化钙的冻干粉
Preparation Note
该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶,磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液,在 −20°C的温度下保存一周,其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8°C中,其活性可降低约20%。它在60°C下,pH值5到7之间可保持活性长达5小时,在68°C时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中,当浓度为1mg/mL时,其活性以6%/小时的速度丧失。
Analysis Note
双缩脲法测定蛋白质。
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