在生物制药纯化过程中,通常有3~5步层析步骤。一般来说,这些步骤使用了不同的分离模式,如亲和、离子交换、凝胶过滤和疏水相互作用等。过去的十年中,由于微生物和哺乳动物细胞培养技术的发展,促进表达量显著提高,间接增加下游纯化的挑战。兼具两种或多种层析原理的多模式层析填料,成为纯化的新选择。
下面为大家介绍百林科几款多模式填料产品性能和应用案例。
阴离子+疏水多模式系列产品
MaXtar MMA (平均粒径75μm)和MaXtar MMA HR(平均粒径40μm),两款填料由多个不同性质的基团组成:氨基、氢键和疏水基团。该层析介质可以去除聚集体、核酸、宿主蛋白、病毒等主要杂质,广泛应用于多糖、抗体、病毒载体或疫苗领域。具有明显的性能优势:
• 改良的 MaXtar 基架具有更强刚性,因此在较低的反压下能够实现更高工艺流速,提高工艺效率。
• 高动态载量,一步结合大部分杂质,节约时间和成本。
• 耐受广泛的 pH 和电导率范围,有助于摸索最优工艺条件。
• 多用于挑战性样品的纯化,尤其对聚集体去除表现突出。
阳离子+疏水多模式系列产品
MaXtar MMC (平均粒径75μm)和MaXtar MMC HR(平均粒径40μm),两款填料由多个不同性质的基团组成:羧基、氢键和疏水基团。该层析介质能在高电导率环境下,依然保持对带正电的生物分子的结合能力,便于前序高盐洗脱或高盐预处理后样品的分离纯化。具有明显的性能优势:
• 改良的 MaXtar 基架具有更强刚性,因此在较低的反压下能够实现更高工艺流速,提高工艺效率。
• 在高电导率环境下,依然保持高动态载量,省去缓冲液置换操作,提高收率,节约成本。
• 更小的粒径可以为层析工艺提供更高的分辨率,使产物的纯度更高。
►►►应用案例
案例一:MaXtar MMA流穿模式去除聚集体
• 预平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc , pH 4.0
• 平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 125 mM NaCl, pH 5.0
• 上样:双抗阴离子收获液(醋酸调节pH调节到5.1)(载量40 mg/ml)
• 淋洗Buffer: 50 mM Tris-HCl, pH5.0
图1: MaXtar MMA层析图谱
图2: MaXtar MMA层析前后SEC-HPLC检测图谱
小结:结合层析图谱和SEC-HPLC检测图谱可见,纯度由91.8%提升至99.5%,双抗的聚集体含量由 6% 下降到至 0.5%,聚集体去除明显。
案例二:MaXtar MMC流穿模式去除聚集体
• 平衡Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 225 mM NaCl ,pH 5.5
• 上样:双抗亲和收获液(调节pH调节到5.5)(载量40 mg/ml)
• 淋洗Buffer: 50 mM NaAc-HAc, 225 mM NaCl, pH 5.5
图3: MaXtar MMC层析图谱
图4: MaXtar MMC层析前后SEC-HPLC检测图谱
小结:通过层析图谱和SEC-HPLC检测图谱可见,纯度由96.5%提升至99.7%,双抗的聚集体含量由 3.5% 下降到至 0.3%,聚集体去除效果同样明显。
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