在抗体药物的工艺开发过程中，往往需要根据IgG含量测定进行后续工艺筛选和开发，百林科ChromaX®A20是一款能够快速、准确测定细胞培养上清液中的抗体浓度(或滴度)而设计的Protein A亲和色谱分析柱，其以多孔结构的聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)微球为填充载体，重组Protein A为配基，通过表面处理技术和偶联技术研制而成的，用于IgG快速质量分析。
产品特点
✔ 亲水PS-DVB基材，具有刚性好，反压低，传质快的特性。
✔ 亲水处理技术，使非特异性吸附降至低，确保抗体浓度测试结果的准确性。
✔ Protein A 特异性结合IgG的Fc区域，高选择性保证浓度测定结果的准确。
✔ 不锈钢柱体，可在HPLC上直接使用。
✔ 快速高效，2~5 min内即可完成一次分析。
✔ 在抗体浓度0.02~10 mg/ml的宽范围内具有良好的线性。
✔ 采用耐碱Protein A配基，可以用0.1 M NaOH溶液对色谱柱进行再生。
产品参数
表1. 色谱柱规格
* 动态载量的测试条件：保留时间1min，当IgG的穿透量达到10%时，单位介质体积(ml)的IgG上样量(mg)
ChromaX®A20 应用案例
ChromaX®A20良好的线性关系
在抗体培养上清液较宽浓度范围内线性关系良好，高达0.9999。
测试条件
• 色谱柱：ChromaX®A20
• 流动相：
Buffer A:
20mM PB+150mM NaCl, pH 7.2
Buffer B:
0.1M HAC+150mM NaCl, pH 3.0
• 样品：不同稀释浓度单抗细胞培养上清液
• 流速：2 mL/min
• 进样体积：20 µL
• 检测波长：280nm
图1:单抗细胞培养上清液标准曲线
ChromaX®A20 耐用性较好
通过1284次进样之后的结果对比，可见实验峰形保持一致，峰高无和主峰保留时间保持一致；且多次进样后峰面积与进样体积的比例关系良好，R² = 0.9995。
测试条件
• 色谱柱：ChromaX®A20
• 流动相：
Buffer A:
20mM PB+150mM NaCl, pH 7.2
Buffer B:
0.1%HCl +150mM NaCl, pH 1.9
• 样品：10%猪源血清提取物
• 流速：1 mL/min
• 进样体积：10 µL
• 检测波长：280nm
图2:1284次进样检测叠图
图3：多次进样后标准曲线
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