为帮助大家能更深入了解深层过滤，乐纯生物将带来《深思熟“虑”》系列性深层过滤知识课堂，本次将围绕性能测试的原理方法以及过程中的相关参数进行展开。
测试方法篇
深层过滤器目前通用的测试方法仍是恒流过滤，这与以除菌过滤器为代表的恒压过滤方式有所区别。
恒压过滤(Vmax)
恒压过滤，即在固定压力下将料液由上游压入，通过膜片后自下游流出，计算下游滤液的滤速(即单位时间内下游滤液的重量)，过程中调节控制压力维持在一个常数。表面过滤(主要指膜过滤)常采用恒压过滤。
随过滤操作时间的推移，下游滤速会减慢，但需要较长时间才会完全堵塞停止，通过在过滤过程中设置几个取样点，根据这几个取样点的相关参数信息，代入相应公式可计算出其载量(L/m2)。
恒流过滤(Pmax)
由于深层滤器是由纤维和助滤剂组成的，有一定厚度(通常3-5mm)的过滤介质，内部又含有具有吸附功能的树脂，因此不适用于恒压过滤(Vmax)，通常采用恒流过滤(Pmax)方式进行，即在恒定流速下进行过滤操作。
深层过滤器过滤的料液一般杂质多、浊度高，因此较容易产生堵塞，具体表现为压力升高、下游浊度逐渐上升、滤出液流速逐渐减小，一般在两小时左右即可到达过滤终点。在过滤过程中记录相关参数，即可直接得出其载量(L/m2)。
除深层过滤器外，容易发生堵塞的表面过滤器也可以采用恒流过滤的方法来测定其载量。
测试参数篇
载量
载量：L/m2，即用1平米膜包可过滤料液的体积，一般使用测试过程中下游滤液体积/测试膜包过滤面积来表示。这是衡量过滤性能较为重要指标之一。
不同料液的载量千差万别，即使采用相同料液(如疫苗)，由于各个厂家的工艺不同，其滤器选型及载量等性能指标也不尽相同。
下游滤液浊度
通常用NTU表示，用来表示滤液的清澈程度。
各家客户对下游滤液的浊度要求都不同，因此需要提前与客户商议，这也是表征过滤性能的重要指标之一。为防止对后续除菌滤器及层析工艺等造成过大负荷，多数客户对滤出液浊度要求小于20NTU，甚至小于10NTU。
预冲洗量&速度
在深层滤器进行料液过滤之前，先需要用纯化水/即用型注射用水进行冲洗，必要时还需进行缓冲液置换。
进行冲洗的目的是降低深层滤器的溶出物水平和释放颗粒数量，进行缓冲液冲洗是为了保持后续过滤过程中目标蛋白的稳定。一般采用冲洗速度为200-600LMH，乐纯生物LeClafine®深层过滤器系列的预冲洗体积为50L/m2。
过滤速度/通量
通常用LMH来表征，即每小时通过1平米膜包的液体体积。通常过滤速度会在前期进行多次测试来确认，通常深层滤器的过滤流速设定为70-200LMH。
死体积&顶洗
死体积是指停留在深层滤器中液体体积。在过滤结束后，为了回收这部分残留在深层膜包中目标蛋白，需要用缓冲液对深层滤器进行顶吸，一般顶洗量为1-2个死体积。
蛋白回收率
这是表征深层滤器性能的又一重要指标，深层滤器应尽量减少过滤前后目标蛋白的损失。
表征蛋白回收率计算公式为：
【(下游滤液体积+顶洗液体积)*下游混合液蛋白浓度】/(上游过滤料液消耗体积*上游料液蛋白浓度)。
一般在抗体行业客户要求蛋白回收率不低于90%，在某些行业需要与客户商定最终蛋白回收率标准。
HCP/DNA的去除
HCP即宿主细胞蛋白，除目标蛋白外其余的宿主蛋白可以被定义为杂蛋白，是需要去除的部分。DNA(脱氧核糖核酸)也是需要被去除的部分。在澄清步骤中采用深层过滤，可以有效降低HCP/DNA含量，可有效降低后续操作的负荷。
经多次实践测试，乐纯生物的LeClafine®深层过滤器系列能较好地满足客户对载量、浊度、蛋白回收率及HCP/DNA去除的需求，总体具有均衡的优异性能和稳定的表现。
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