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KNAUER SMB模拟移动床色谱

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更新时间:2023-11-04 10:10:28浏览次数:122

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产品简介

KNAUER SMB模拟移动床色谱

详细介绍

摘要:

SMB色谱是一种高效高纯的分离和纯化二元系混合物的高效色谱技术。Knauer公司的AZURA® SMB系统在药物和食品等产业广泛应用,小分子比如的生产,也可以用在大分子蛋白抗体的生产,小分子和大分子纯化的两种分离模式应用证明了AZURA SMB系统模块化的灵活性 。

SMB的优势:

模拟移动床色谱是一种连续的色谱技术,能够将二元或赝二元系混合物分离为纯物质或组分。与传统的批色谱法相比,该方法连续分离和提取两个部分,从而获得更高的纯化物质产量,同时消耗更少的洗脱液和填料。在经典的单柱色谱分离中,只有一小部分色谱柱参与了分离,而主要部分仍然没有使用,与SMB工艺整柱都被有效利用相比,单柱工艺的产率是明显低的。

Knauer-Azura SMB系统的模块化概念允许灵活地适应不同的分务(图1)。典型的8柱配置,每区两根柱,通过改变每区的柱数量能够很容易适应工艺优化。此外,它还可以在开环和闭环模式之间切换开关。

SMB在纯化中的应用:

一个经典的SMB八柱工艺开环模式应用通过从发酵浆液中纯化展示(图2)。是一种五碳多元醇甜味剂,主要用作食品工业的葡萄糖的替代品,例如用在口香糖等。它是从如桦木纤维素水解转化到的。高效液相色谱分析发酵浆液,结果表明,木糖转化是成功的,SMB工艺可行。选择特定的Knauer聚合物基Eurokat CA修饰柱用于糖分离,水作为洗脱剂。确定参数方法后,设计了一个SMB工艺,两个出口产物作了高效液相分析,从萃取液成功分离和纯化(图3和图4),1.8g纯化1小时,得到99%纯度和99%回收

免疫球蛋白G抗体作为大分子的例子

图2 :SMB工艺流程设计示例方案

4泵,进出口,8柱,4区,流速,流量、压力和循环时间显示;PurityChrom® MCC软件

图3:发酵提取液半制备色谱图

进样: 淡蓝色–0.5毫升,蓝色–1.0 毫升,深蓝色2.0毫升。

图4:重叠分析色谱图
提取液/除外(深蓝色);提取物/(浅蓝色);废液(蓝色)。

SMB在纯化生物分子中的应用:

同一个Azura SMB系统和相同多柱捕获方案工艺(MCCP)可用于蛋白质的连续纯化。 例如在捕获模式下的抗体。可以灵活的适应不同柱子匹配不同净化步骤(吸附、清洗、洗脱和再生),节省了时间、柱成本和纯化目标蛋白的溶剂消耗。该软件支持从经典SMB到 MCCP工艺(图5)。对于MCCP过程,检测器可以集成到系统来监控和调节整个工艺过程。


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