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技术文章

Dispase® II

阅读:1254          发布时间:2017-8-9

产品描述

Dispase 中文名称为中性蛋白酶,也称为分散酶,是一种非特异性的金属蛋白酶,被用来从各种不同组织或器官中消化细胞外基质,释放并制备原代单细胞;或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移;也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团。

蛋白水解酶类,如胰蛋白酶、胶原酶和链酶蛋白酶都被用语来分散组织、分类细胞,但他们常伤害细胞,并且在培养时不稳定,甚至可能引入支原体污染。 Dispase 就没有这个问题,不会给细胞膜带来伤害,而且因为其来自细菌,故不会引入支原体或任何动物病毒;温度、 pH 、血清成分等的差异对 Dispase 影响很小。 Dispase 经稀释后其活性就大大降低,这也方便了后续的培养。 Dispase 甚至被加入细胞培养悬液中用于防止细胞团结。

 

势:

该酶已被证实作用迅速有效又温和;

细胞能保持完整,细胞膜无损;

该酶非哺乳动物来源,不含支原体或动物病毒污染;

对于温度、 pH 的改变、以及血清成分都很稳定;

使用螯合剂或稀释就能简单灭活;

酶编号: EC 3.4.24.4

酶活定义:

1U 是在检测条件下 1 分释放相当于 1 umol 酪氨酸的 Folin 阳性氨基酸或肽的酶量; DispaseII  ≥0.8 U/mg (37oC ,使用酪蛋白作为底物, pH 7.5)  1U Dispase II 基本相当于 600U 日本单位的 Dispase 

抑制剂:  EDTA  EGTA  Hg2+ 、其他重金属。血清不会抑制酶活性。

使用方法:

 Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl) 溶解 Dispase  10 mg/ml ,使用时用细胞培养液稀释到 0.6-2.4 U/ml 。不推荐高于 2.4 U/ml    工作浓度,可用 0.22 um 的无菌滤膜过滤除菌。

保存于运输说明:

保存在 +2 ° ~+8 °;配成溶液后,在 +2 ° ~+8 ° 2 周内使用有效,在 -20 ° 2 个月内使用有效;不要反复冻融;储存液用 Hepes 盐缓冲液稀释后, +2 ° ~+8 °, 3 天内使用有效。

按照 Roche 提供的条件保存和运输

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