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在实验室中,选择合适的PCR板是确保实验成功的关键

时间:2025/4/30
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  在实验室中,选择合适的PCR板是确保实验成功的关键


  PCR板的选择会对实验结果产生重要影响。在实验准备过程中,PCR板虽然常被忽视,但其重要性不亚于试剂和仪器设备,直接关系到实验的成败。在进行PCR实验前,请务必重点关注以下五个核心问题。

  购买PCR板时需重点考量以下五大核心因素,确保实验准确性和效率:

  一、材料纯度与生物兼容性

  二、热传导性能

  三、光学特性适配

  四、结构设计与密封性

  五、规格匹配与标识系统

  注:特殊实验场景(如机器人操作)需额外验证边框强度,推荐聚碳酸酯加强型96孔板。


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  1 选择合适高度的PCR板

  当您从PCR仪中取出反应板时,是否曾发现某些孔位未加样、密封膜出现冷凝水珠,或是孔壁变形导致中部隆起?这些异常现象往往源于使用了与仪器不匹配的PCR板高度规格。

  PCR仪或实时荧光定量PCR仪的热盖组件含有加热压板装置,当热盖闭合时,该装置会对PCR板施加特定压力。若使用高度过大的反应板,会导致压力超标,在热循环过程中造成孔壁受压变形;反之,若在适配高型板的仪器中使用低型板,则会导致压力不足,进而可能引起样本冷凝或蒸发。可调节盖板的仪器适配高、低两种规格的板。此类仪器的常见识别特征为配有用于紧固或松开盖板的调节旋钮。部分仪器可自动检测微孔板高度并自行调节,这种设计能灵活选用适合实验应用的微孔板。而固定高度盖板的仪器则必须搭配特定尺寸的微孔板使用。准确识别仪器的盖板与微孔板规格参数,可有效避免密封方式不当导致的孔板压裂问题。

  02 选择合适的裙边

  PCR板的裙边是指板体外围的框架结构,其主要功能是增强反应板刚性,并为自动化机械臂提供平整的抓持面。根据裙边设计差异,PCR板可分为三种类型:

  无裙边

  半裙边

  全裙边

  半裙边

  • 垂直延伸结构约为孔深的一半

  • 提供适中的结构支撑


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  全裙边

  • 垂直结构延伸至孔板底部

  • 提供最大机械稳定性

  • 便于移液监控 - 使用者可通过孔板底部、侧面或顶部直接观察样本体积透明孔采用未添加染料的聚丙烯材料制成,因而具有半透明特性。

  主要优势:

  • 直观识别加样失误 - 可清晰判别漏加孔或孔间体积差异。主要缺陷在于存在荧光信号穿透风险:

  • 当某孔的荧光信号渗漏至相邻孔时,会导致邻孔检测结果假性偏高。

  • 若高荧光信号样本与低靶标浓度样本相邻时尤为严重,信号穿透将人为提升低浓度孔的检测值。

  无裙边

  • 框架仅延伸至孔板边缘

  • 不具备垂直延伸结构

  • 光信号优化机制:不透明孔壁有效阻隔侧向光散射,显著提升信噪比白色孔采用添加白色染料的聚丙烯树脂制成,形成不透明孔结构。

  主要优势:

  • 实验敏感性保障:对低浓度样本的信号扩增与检测具有关键性提升。

  • 抗干扰性能:消除相邻孔间荧光穿透风险。主要缺陷

  • 样本可视性受限 - 仅能通过垂直俯视观察孔内样本存在与否及液量情况。

  • 需依赖惰性染料标记(提升样本可视性)。

  4 是否需要硬框

  容易扭曲变形的PCR板不仅操作困难——还可能影响PCR反应效率。若PCR板无法平放在热循环仪模块上,各孔位可能与模块接触不均,导致样品受热不均匀。更严重的是,未能正确就位的PCR板在经历升降温循环时可能发生扭曲变形,致使管盖或光学密封膜移位,造成样品蒸发。当然,易变形的PCR板也无法兼容自动化机械臂操作。

  5 选择信任的供应商

  为了避免可干扰DNA扩增的污染,PCR/qPCR塑料耗材应不含核酸酶和DNA的污染。尽管如高压和辐射等灭菌方法可去除细菌和DNA酶,但这些方法并不能去除灰尘和DNA残留。残留的灰尘客户可能会抑制PCR 而片段化的DNA依然可作为模板从而产生非特异性的扩增。

  天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。

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