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上海柏欣仪器设备厂
主营产品： 干燥箱;培养箱;恒温恒湿箱;人工气候箱;光照培养箱; |
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上海柏欣仪器设备厂
主营产品： 干燥箱;培养箱;恒温恒湿箱;人工气候箱;光照培养箱; |
2012-5-22
应用zui广的核酸浓缩法是酒精沉淀法。在中常液体浓度单价阳离子存在下，参加一定量的酒精后，所形成有核酸沉淀可经离心而回收，甚至于对低至pg量的DNA 或RNA，也可定量回收。回收的核酸可按所需液体浓度，再溶于合适的缓和冲突液中。
具徒手体操作时，可向含样品的小离心管中参加V/10单价阳离子盐储存液2V无薄酒精，混匀，放冰水浴中15－30min，抽取目测均衡，0－4度，12000g，离心10min。吸弃上清，再另70酒精0.5－1ml，12000g，0－4度荡涤离心2min。吸弃上清，沉淀用油泵抽干或敞开盖子晾干后，溶于合适大小的缓和冲突液中。
单价阳离子盐的挑选，主要基于下述思索问题：用CH3COOH铵可减损dNTP的共沉淀，但在往后要作核酸的磷酸化时应防止用CH3COOH铵，因铵离子是T，多核苷酸激酶的猛烈制约剂。当用较高液体浓度的酒精沉淀RNA时，常用LiCl，因LiCl在酒精中溶解度颀长，不随核酸共沉淀。包括SDS的核酸样品，应运用NaCl，这时该去垢剂要70酒精中仍维持可溶。DNA 和RNA沉淀，大部分运用CH3COOH钠（pH5.2 ）。
