在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的:
酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
小鼠(MIP-1β/CCL4)ELISA Kit
Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β,MIP-1β ELISA kit
小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.