在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的:
固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
小鼠(VEGF-D)ELISA Kit
Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA kit
小鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒 | 进口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.