破伤风抗体ELISA检测试剂盒 返回列表页

破伤风抗体（Tetanus Ab）试剂盒（酶联免疫吸附试验法）使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断

l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人破伤风抗体（Tetanus Ab）的含量。

l有效期：6个月

l保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人破伤风抗体（Tetanus Ab）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人破伤风抗体（Tetanus Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

[样本处理及要求]

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

破伤风的病原体为破伤风梭菌，这是一种厌氧菌，广泛分布于土壤及环境、人及动物粪便中。破伤风梭菌通过皮肤黏膜破口进入人体是致病的发病原因。

诱发因素
破伤风梭菌在一般浅表的伤口不易生长，其感染的重要条件是局部形成“厌氧微环境"，以下因素会增加感染破伤风梭菌的风险：
1.伤口被泥土、粪便、痰液污染；
2.钉子或针造成的穿刺伤；
3.烧烫伤、挤压伤、炸伤等；
4.开放性骨折；
5.动物或昆虫咬伤；
6.慢性鼻窦炎、中耳炎、口腔感染、肛旁脓肿等；
7.新生儿脐带感染；
8.异物残留在体内，如钉子或碎片。

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