1. 真空采血管的选择：以往真空采血管的材质多为玻璃材料，玻璃试管的主要成分是亲水性硅酸盐，采血后玻璃试管内壁可出现吸附水分子的吸水层，所以分离胶不能直接黏附于玻璃试管的内壁。随着放置时间的延长，红细胞中的钾或者酶等物质，可以通过水分子吸水层向血清中扩散。所以，玻璃采血管在原状态下保存血清的期限以2~3d为宜。塑料采血管常为聚对苯二甲酸（乙二）醇酯（polyethyleneterephthalates，PET）材质，疏水性质、其管壁不发生水分子层，分离胶可牢固地黏附着内壁上，红细胞中的钾不能扩散到血清中，因而冷藏保存8d血清钾含量不变。PET塑料真空采血管可在-20℃保存标本，这是普通塑料试管和玻璃试管难以达到所以，选择真空采血管时尽量用PET塑料采血管为佳。
2. 推荐的采血顺序： 凝血管（血清管）→枸橼酸钠管→肝素或EDTA管→草酸钾-氟化钠管→血沉管。主要原因是*管内往往含有组织液，易造成凝血，不适于做血凝测定。
3. 取血时患者应松弛，环境温暖，防止静脉挛缩，束膊时间不可过长，禁止拍打手臂，否则可造成局部血液浓缩或激活凝血系统。观察采血是否顺利，采血量是否符合要求。由于实验室样本量的不断增加，传统实验室分离血清标本的速度与全自动化分析仪很不同步，因为血液凝固速度与玻璃试管和塑料试管的激活能力、温度密切相关。实验证明，凝血因子中的Ⅺ、Ⅻ因子接触玻璃试管壁后被激活，一般采血后在23~25℃室温条件下，30min大部分血液已凝固，*凝固需要1h。但是，疏水性的塑料试管壁接触凝血因子Ⅺ、Ⅻ时，被激活的能力非常弱，需要2~4h血液才能*凝固，影响了分离血清的速度。在采血试管内壁表面喷涂血液促凝剂才能解决上述存在的问题。采血后轻轻倒转试管混合4~5次，置室温立放待血液*凝固后离心，血液呈现收缩状态，可观察到有血清渗出现象，证明血液*凝固。
4. 血清分离胶促凝采血管离心操作的要求：如何正确地使用分离胶促凝管制备高质量血清标本，血液*凝固和离心条件是至关重要的两个环节，离心要求采用水平式离心机。具体操作步骤是:采血后立即轻轻倒转采血试管4~5次混匀标本，等待标本充分凝固需要放置30min，离心半径8cm，离心速度维持在3500~4000r/min离心10min。血清与血凝块*被分离胶分离，血清标本可直接上机检测或转移至仪器配套试杯中。具备这个条件才能制备出高品质血清标本，说明分离胶效果好。如果离心速度过低，作用于分离胶的力比较弱，分离胶返转不佳或者血液没有*凝固就离心，可出现纤维蛋白凝状物停留在血清中或胶体层中，有可能引起溶血，除急诊外普通生化检查在血液*凝固后离心效果交好。由于缺乏经验，这种现象在实验室初始使用分离胶凝采血管时经常发生，如果有纤维蛋白丝停留于血清中很容易阻塞自动分析仪采血针。目前许多国产分离胶质量已达到或接近水平，许多医院的使用表明和美国BD公司等同类产品的分离时间，分离效果几乎没有区别。经用国产（友利）分离胶塑料试管，对生化、免疫30多个项目是否影响测定值作了调查，用普通玻璃试管做对照并和美国BD公司同类产品进行比较实验研究，两者之间具有很好的可比性，结果无显著性差异（均p>0.05）。
5. 血液与抗凝剂的比例必须，抗凝剂在血标本中的含量可改变血浆中钙离子浓度进而影响实验结果。钙的浓度越高，PT、APTT凝固时间越短。关于凝血试验真空管“死腔”问题，有实验表明真空管死腔会产生血小板活性增强（PF4活性增强）、APTT缩短现象的原因可能是多方面的，由于死腔激活血小板是随机偶然事件，目前尚未对其发生机理和概率有明确的认识。因此，在进行血小板功能试验及监测APTT以指导肝素抗凝治疗时对实验结果产生的偏差。
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