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公司动态

普通PCR,荧光定量PCR技术服务,实验代做

发布时间:2013-11-6

北京方程生物实验室代做实验,具体项目有:普通PCR、荧光定量PCR、TUNEL凋亡、HE染色、Western Blotting 、Elisa检测等,

:王 :  在线客服:21570372

 

实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的 mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。

 

SYBR Green荧光染料法SYBR Green是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光。它的zui大优点就是可以与任意引物、模板相配合,用于任意反应体系中。从经济角度考虑,它也比其它的探针的价格要便宜得多。但由于它能与所有的双链DNA结合,所以一旦反应体系中出现非特异扩增,那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素,可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特异性影响。

 

TaqMan荧光探针法:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。

项目

说明

引物设计合成

客户提供基因名称(中英文全称)。

RT-PCR检测(普通电泳PCR

包括所有试剂,提供分析数据、步骤。

实时荧光定量(Taqman探针法)

包括所有试剂,提供分析数据,图片、步骤(20例起

SYBR Green 染料法

包括所有试剂、提供数据、图片、实验步骤。

 


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