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大豆PCR检测试剂盒使用方法
1.扩增试剂准备(PCR前准备区)
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2.样本处理(样本处理区)
1.1.先对痰液样本进行目测,若样本中唾液占大部分,则需重新采集样本。
1.2.目测合格后,在样本中加入2~3倍体积4%的NaOH溶液,<采希?50rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr,使其充分液化(无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化*;若液化不*,可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化*)。
1.3.取液化后的样本900ul以及试剂盒中的阴性对照、强阳性对照和临阳性对照各500ul于1.5ml无菌离心管中,13,000rpm离心10min。
1.4.弃上清(先倒出大部分液体,再用移液器尽量吸干至无明显液滴为止),沉淀中加入1ml灭菌生理盐水,大豆RR PCR检测试剂盒振荡悬浮(注意:按紧离心管盖后,横向按在旋涡振荡器上将沉淀振起),13,000rpm离心10min。
1.5.弃上清,用1ml灭菌生理盐水洗涤沉淀,13,000rpm离心10min。
1.6.弃上清,向沉淀中加入DNA提取液30ul,振荡混匀,2,000rpm离心5sec,放37℃温浴30min,再放入100℃水浴/干浴10min,13,000rpm离心10min,保留上清备用。(如果样本裂解产物当天不使用,请于-20℃保存。)
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