大豆PCR检测试剂盒使用方法

大豆PCR检测试剂盒使用方法

1.扩增试剂准备（PCR前准备区）

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2．样本处理（样本处理区）

1.1.先对痰液样本进行目测，若样本中唾液占大部分，则需重新采集样本。

1.2.目测合格后，在样本中加入2～3倍体积4%的NaOH溶液，<采希?50rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr，使其充分液化（无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化*；若液化不*，可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化*）。

1.3.取液化后的样本900ul以及试剂盒中的阴性对照、强阳性对照和临阳性对照各500ul于1.5ml无菌离心管中，13,000rpm离心10min。

1.4.弃上清（先倒出大部分液体，再用移液器尽量吸干至无明显液滴为止），沉淀中加入1ml灭菌生理盐水，大豆RR PCR检测试剂盒振荡悬浮（注意：按紧离心管盖后，横向按在旋涡振荡器上将沉淀振起），13,000rpm离心10min。

1.5.弃上清，用1ml灭菌生理盐水洗涤沉淀，13,000rpm离心10min。

1.6.弃上清，向沉淀中加入DNA提取液30ul，振荡混匀，2,000rpm离心5sec，放37℃温浴30min，再放入100℃水浴/干浴10min，13,000rpm离心10min，保留上清备用。（如果样本裂解产物当天不使用，请于-20℃保存。）