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分析Rt-PCR,qPCR及PCR的差异2022/10/24
PCR全称聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction),指利用Taq和/或Pfu核酸酶惊醒的体外特异性扩增某特定核算序列Rt-PCR一般指反转录PCR(ReverseTranscr...
PCR反应模板核酸的提取制备方法2022/10/17
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基本技能,决定分离模板核酸(DNA或RNA)的质和...
标准物质特性和基本要求具体分析2022/10/10
标准物质定义:为了保证分析测试结果具有一定的准确度,并具有可比性和一致性,常常需要一种用来校准仪器、标定溶液浓度和评价分析方法的物质。标准物质已经确定了具有一个或多个足够均匀的特性值的物质或材料,作为...
了解单克隆抗体必看干货2022/10/5
单克隆抗体(monoclonalantibody,Mab)技术是20世纪免疫学技术的一项里程碑式突破.该技术将免疫小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合生成杂交瘤细胞,这种杂交瘤细胞核内含有双亲细胞的染...
ELISA试验手工洗涤操作过程2022/9/26
洗涤在ELISA试验过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA试验就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反...
抗体特异性选择需考虑的四个方面2022/9/19
抗体(antibody)免疫细胞分泌免疫物质,是哺乳动物适应性免疫系统对抗病原体的核心,它是在病原体刺激下由浆细胞(效应B细胞)所分泌的一种免疫球蛋白,能够识别并结合特异的病原体抗原,随后通过介导中和...
样品的采集检测及培养基的灭菌使用2022/9/13
样品的采集及检测:一、保证采样器具的无菌性1.玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,导致玻璃器皿易裂纹而报废)。2.取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒3.取样勺...
细胞凋亡概述2022/9/5
细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在一定的生理或病理条件下,受内在遗传机制控制,按照自身程序主动性、生理性的死亡过程。细胞凋亡受凋亡相关基因调控,故又称为程序性细胞死亡(programmedcel...
按抗原来源与宿主的亲缘关系分类及其制备的方法2022/8/30
根据抗原的来源以及与宿主的亲缘关系分类指来自机体以外的物质。其制备的方法又分为:1、天然抗原是指自然界存在的蛋白质、多糖和结合蛋白。这类抗原相对分子量大、结构复杂,研究其免疫原性和反应原性的特异性有较...
ELISA出现“花板”原因及解决办法2022/8/22
酶联免疫吸附试验(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)于1971年分别由瑞典学者和荷兰学者报道,开创了运用酶标记免疫技术进行液体标本中微量物质测定的实验方法。其原...
PCR引物设计的几个原则2022/8/15
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些...
逆转录实验要素解说2022/8/8
逆转录(reversetranscription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成,逆转录实验包括3大要素,分别是引物、逆转录酶和RNA模板:1.引物:逆转录引物主要有3种...
PCR反应特点与流程2022/8/1
PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶链式反应)是模拟体内DNA复制过程,对特定DNA序列进行大量扩增的一种技术。PCR反应是以4种dNTP为底物,引物引导,DNA聚合酶催化作...
选购ELISA试剂盒步骤及重点考虑要素2022/7/25
ELISA试剂盒的选择有许多考虑的因素,比如说实验目的、价格、操作方法等因素。比如检测蛋白,基本有下列步骤:第一步,明白检测何种蛋白。第二步,明确编码该蛋白的基因与其他哪些物种同源性最好。第三步,寻找...
免疫学ELISA、免疫组化、WB三大工具特性2022/7/18
ELISA(酶联免疫吸附试验):用到了免疫学原理和化学反应显色,待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液,因而没有用到组织包埋、切片等技术,这是与免疫组化的主要区别,操作上开始需要将抗原或...

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