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灵敏度更高的定点突变试剂盒

时间:2020-1-2
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定点突变试剂盒可以在克隆于质粒DNA序列的特定位点诱导突变。理论上可以保证突变率达到100%。整个实验过程简单快捷只需要两个步骤。试剂盒不需要用到M13载体和甲基化步骤。该试剂盒可以诱导某个已知基因的特定碱基进行定点突变、再突变成野生型、密码子突变、插入或者缺失等,因此可以用于功能基因组学和蛋白质组学的研究。另外由于试剂盒能够诱导特异基因突变,又可以应用于蛋白质工程学研究领域。定点突变试剂盒操作十分简单(根据我们提供的引物设计原则设计引物;用Muta-direct™酶进行15~18个循环的PCR扩增反应;Mutazyme™酶处理选择突变克隆;转化)。理论上在LB平板上的克隆100%是突变克隆,通过对突变克隆的测序分析,正确的突变可以应用于后续实验。

基因定点突变常用于研究基因的转录调控、RNA或蛋白质的结构和功能,以及用于质粒中部分序列的微调等。

本试剂盒使用了新的保真性更强,灵敏度更高,扩增速度可达2kb/min,扩增长度可达12kb的BeyoFusion™ DNA Polymerase,从而大大缩短了突变反应所需的时间,进一步提高了基因定点突变的成功率。同时进一步严格验证了试剂盒中的DpnI,确保能在5分钟内充分消化掉甲基化的模板质粒,同时不会消化未甲基化的PCR产物。

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