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ELISA试剂盒的清洗

2013-8-15 

 

ELISA试剂盒的清洗
试验原理:
 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
 自备材料:
 1. 蒸馏水。
 2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
 3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
 1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
 2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
 3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项:
 1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
 2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
 3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
 4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
 5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
 6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
 7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
 8. 加入ELISA试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
 9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
 


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