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碱性磷酸酶染液说明书
2015-10-16
 提 供 商 |
齐一生物科技（上海）有限公司 |  资料大小 |
23.3KB |
|---|---|---|---|
 资料类型 |
PNG 图片 |  资料图片 |
|
 下载次数 |
114次 |
碱性磷酸酶染液说明书
（Cell Alkaline Phosphatase Stain）
【检验原理】
细胞中碱性磷酸酶（cAKP）在碱性的缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，成不溶性的偶氮染料，沉着于有cAKP活性的部位。适用于血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以石蜡切片脱蜡梯度入水后。
【试剂组成】
可染 20～30 张涂片
本所附赠疏水膜1张。
【储存条件及有效期】
本试剂盒应置室温密封保存，有效期6个月。
【试剂配制】
〇 底物应用液的配制：临用时将 1 支乙粉剂倒入 1 支甲溶剂中，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3次，使二者充分混合，*溶解后才可加入1支丙粉剂，再充分摇动使其*溶解，配成底物应用液待用。底物应用液要新鲜配制，用多少配多少。
【操作步骤】
① 固定：新鲜血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片用固定液固定3 min左右。 （石蜡切片脱蜡梯度入水后不需固定） ② 加底物应用液：固定后的样本，滴加新鲜配制的底物应用液盖满样本部分，加盖疏水膜，放置湿盒中，避光37℃孵育 15min，水洗。（此时覆盖在样本上的疏水膜会遇水掉下） ③ 复染：趁湿用复染液(苏【染色结果】
血涂片及骨髓涂片的观察： 选涂片中厚薄均匀的部位滴加香柏油用油镜检查，灯光适中。细胞核呈紫色， cAKP阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒，其强度可按Kaplow记分法表示。
0 胞浆内无红色或无咖啡色；
1 弥散的红色并偶见红色或咖啡色颗粒；
2 弥散的红色，有中等量的红棕色颗粒；
3 显著的红色，有较多的红棕色或咖啡色颗粒；
4 显著的红色并有粗大的红棕色或咖啡色、深咖啡色颗粒充满胞浆。 木素或者甲基绿，两者取其一)染3min左右。水洗，镜检。
