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土壤过氧化氢酶试剂盒说明书
2017-9-20
 提 供 商 |
齐一生物科技（上海）有限公司 |  资料大小 |
26.2KB |
|---|---|---|---|
 资料类型 |
PNG 图片 |  资料图片 |
|
 下载次数 |
45次 |
土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类，在H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理：
H2O2在 240nm下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即
可反应 S-CAT活性的高低。
土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书 需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水
试剂组成和配制：
试剂一：液体 100μL×5 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 9.9mL蒸馏水充分溶解后待用；用不
完的试剂 4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入 2mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂 4℃保
存；
试剂三：液体6mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定步骤：
试剂名称 测定管 无基质管 无土管
风干土样（g） 0.1 0.1
试剂一（μL） 1000 1000
双蒸水（μL） 1000
25℃振荡培养 20min
试剂二（μL） 25 25 25
混匀 8000g，25℃离心5min，取 820μL上清
试剂三（μL） 96 96 96
混匀，用蒸馏水调零，240nm处记录各管 A值。
土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书 注意：每个测定管要设一个无基质管，无土管只要做一管。
S-CAT 活性计算：
单位的定义：每天每 g风干土样催化 1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷（ε×d）
×106
]÷W÷T=18.9×（A无土管-A测定管+A无基质管）
V反总：反应体系总体积，1.145×10-3
L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×104
L / mol /cm；
d：比色皿光径，1cm； T：反应时间，20 min=1/72d； W：样本质量，0.1g。
土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书
