联系电话
齐一生物科技（上海）有限公司
初级会员·11年
- 联系人：
- 程成
- 电话：
- 021-60348496
- 手机：
- 18121453965
- 传真：
- 021-51632657
- 地址：
- 上海市松江加工园区
- 网址：
- www.qiyibio.com
扫一扫访问手机商铺
微信扫码进入微名片
土壤脲酶Solid-Urease，S-UE测定试剂盒说明书
2015-10-19
土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
测定意义：
S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、
全氮和*氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
测定原理：
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快
递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存； （自备）
试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入 20mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂 4
℃保存；
试剂三：液体65mL×1瓶，4℃保存；
试剂四 A 液：液体 1mL×1 瓶，4℃保存；试剂四 B 液：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；临用前
将 A液倒入 B液中混合，待用；用不完的试剂 4℃保存一周；
试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存；
测定步骤：
1 、培养
测定管 对照管
风干土样(g) 0.25 0.25
试剂一（μL） 125 125
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min
试剂二（μL） 625
蒸馏水（μL） 625
试剂三（μL） 1250 1250
混匀，放入 37℃水浴培养 24h后，10000g常温离心 10min，取上清液。
2、将培养结束的上清液稀释 10倍（取0.1mL上清液，加入 0.9mL蒸馏水）。
3、测氨量
测定管 对照管
稀释后的上清液（μL） 400 400
试剂四（μL） 80 80
试剂五（μL） 60 60
充分混匀，室温放置20min
蒸馏水（μL） 460 460
混匀， 578nm处蒸馏水调零，测 A值，ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力计算
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0915x +0.0373；x为标准品浓度（μg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每 g土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力（U /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反总÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)
10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V反总：反应体系总体积：2mL；W：样本质量，0.25g。
