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ELISA试剂盒操作步骤
ELISA试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀.不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差.
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数.每个标准品和空白孔建议做复孔.每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔.标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内.
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内.立即加入50ul的生物素标记的抗体.盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟.避免光照.
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果.
在450nm波长处测定各孔的OD值.兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒
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