DNA片段玻璃奶纯化回收试剂盒齐一生物科技（上海）有限公司新品*欢迎您访问我们的如有什么问题请给我们或者留言741653262,告诉我您的需要,并留下您宝贵的意见和建议. 

DNA片段玻璃奶纯化回收试剂盒（（Glass-milk Gel Mini Purification Kit） ） 
 试剂盒内容： 
试剂盒组成 
ZP206-01 
(50次) 
ZP206-02 
(100次) 
ZP206-03 
(300次) 
玻璃奶  0.5ml  1ml  3ml 
溶胶液  25ml  40ml  120ml 
漂洗液W2  15ml  15ml  3×15ml 
洗脱缓冲液TE  15ml  15ml  15ml 
说明书  1 份  1 份  1 份 
   选配试剂： 
3M乙酸钠（pH 5.2）
储存条件： 
本试剂盒在室温（15–25℃）干燥条件下，可保存12个月；更长
时间的保存可置于2–8℃。（注意：当低温贮存时，使用前应先将试剂
盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在 37℃水浴中预热 10
分钟，以平衡溶液温度）。玻璃奶应储存在-20℃，防止沉淀，可反复
冻融。 
 
产品简介： 
利用特殊玻璃微珠吸附DNA的特性, 可快速、高效地纯化、回收 
DNA。与传统的低熔点琼脂糖和PEG回收DNA方法相比, 此试剂盒有以
下特点： 
 快速：整个操作过程可在30-45分钟内完成。 
 高效：常规操作, 回收率zui高可达80%左右。 
 高纯：不含盐、蛋白质、RNA等杂质, 纯度与CsCl密度梯度离心 
相仿。 
 广泛：可以回收100bp-20,000bp的DNA片段。 
                      100bp              DNA片段的回收率>60% 
                              200bp-20Kb    DNA片段的回收率可达70%-80% 
                              20Kb以上       DNA片段回收率可达50％     
 多样：可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。 
 简便：仅在单个Eppendorf管中操作, 易于掌握。 
 安全：不接触酚、氯仿等有害物质。               
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 
1   溶胶液中含有 pH 指示剂，为黄色时，指示 pH≤7.5。若实验过程
中溶液颜色发生变化，请使用 5-10μl  3M 乙酸钠（pH  5.2）将溶
液的颜色调为黄色后再进行后续操作。（溶胶液中含有pH指示剂，
当 pH≤7.5 时溶液的颜色为黄色，此时 DNA 才能够*有效的与
膜结合，当 pH 值偏高时溶液的颜色变为桔红色和紫色，需要进行
调整。） 
2   使用之前请按照瓶体标签提示在漂洗液W2中加入无水乙醇。 
3. 玻璃奶在使用前务必混匀；特别是有沉淀产生时，应振荡或吹打
沉淀消失。 
操作步骤： 
 一、从普通琼脂糖凝胶中回收DNA片段 
1. 待回收的DNA片段经电泳分离后, 从琼脂糖凝胶上切下所需DNA 
片段, 放在1.5ml Eppendorf管中。                           
2. 加入2倍(请准确估量凝胶的体积!)体积的溶胶液(如果凝胶重为0.1 
g，其体积可视为100  μl,则加入200μl溶胶液),  55℃保温6-10分钟, 
其间轻摇Eppendorf管几次使胶*溶化。 
注意：标准是1%的胶，如果是2%的胶则加入4倍体积溶胶液。 
3. 加入10μl玻璃奶(玻璃奶使用前请充分混匀!), 涡旋振荡1-2秒, 冰浴
下放置10分钟；其间每隔2-3分钟混匀一次！12,000rpm离心30秒，
吸弃上清。 
注意：充分振荡混匀，有助于玻璃奶分散开，增大吸附面积，提高得率，但对
大于15k以上的片段有少量的剪切。建议先按我们提供的振荡1-2s操作，如果
剪切程度过大，产物不适合您的后续实验，再做适当调整。 
4. 加250μl漂洗液W2（请检查是否按瓶体标签提示加入无水乙醇）,   
用加样器吹打漂洗液, 轻柔地将玻璃奶悬浮混匀, 12,000rpm离心 
30秒, 吸弃上清。 
5. 重复步骤4(尽量吸尽漂洗液!)。吸取完漂洗液后再离心10秒钟, 
     用10ul Tip头将zui后一点儿漂洗液吸干净。然后, 放置于37℃温箱干 
燥15-20分钟(如果未干, 可适当延长干燥时间! 特别提示:客户也 
可选择50℃的烘箱来干燥玻璃奶,5-10分钟即可,这样可以节省实 
验的时间,整个实验约半小时即能完成)。                                                  
 
6. 加适量洗脱缓冲液TE或无菌蒸馏水或TE(常规加入20μl), 混匀, 
      60℃水浴5分钟, 12,000rpm离心1分钟, 回收上清备用。重复步 
骤6, 能提高回收率。 
 
 二.从溶液中纯化回收DNA片段                           
    1. 在DNA溶液中加入2倍体积的溶胶液和10μl玻璃奶, 振荡混匀, 
室温下放置5分钟。 
    2. 其余步骤同上。 
                                                           
附录： 【优化的PCR 产物克隆连接反应】 
 连接反应实验步骤： 
  1). 50μl PCR反应产物中加入1μl Klenow 酶(约2-5个单位),   
于37℃放置半个小时。   
  2). 采用〖DNA快速纯化回收试剂盒(玻璃奶法)〗回收所需的DNA 
片段。 
  3). 在10 μl反应体系中分别加入：载体pUC18/SmaI 1μl (0.1μg)、
所需插入的外源DNA片段6μl(与载体的摩尔数比约为3比1,或10 
比1 ,甚更高)、50% PEG8000 1μl、10X连接缓冲液  1μl、T4   
DNA连接酶1μl(约1-5个单位)。 
  4). 于16℃放置过夜(>12小时), 随后即可做转化反应。