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DNA 测序

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更新时间:2017-07-12 12:37:34浏览次数:387

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产品简介

DNA测序原理

DNA测序技术主要依据 Sanger 的双脱氧链终止法。

详细介绍

样品要求

样品类型

相应要求

 

 

菌体

1. 说明载体抗性类型,我们提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四种抗生素。 
2.   提供 1ml 左右过夜培养的菌液,加 15% 灭菌甘油,于 Eppendorf 管中封口保存,防止交叉污染或渗漏。 
3.   大量样品测序,建议在一次性塑料培养皿固体培养基上穿刺培养。 
4.   建议尽量提供穿刺培养的菌种。

 

质粒

1. 质粒溶于适量体积双蒸水中(不含 TE ),电泳检测总量大于 2mg 。

2. 建议用相关试剂盒纯化。 
3. 如有可能,同时提供 1ml 含有相应质粒的菌液备用。 
4. 大质粒必需注明载体长度。

 

未纯化 PCR 产物

1. 片段大于 150bp 。 
2. 提供 50ul ~ 100ul PCR 扩增产物 ( 总量 500ng-1ug) 。 
3. 取 3ul 样品,电泳检测应为明亮的一条带,无杂带。

 

纯化 PCR 产物

1.PCR 产物溶于双蒸水中(不含 TE )。

2. 浓度大于 20ng/ul ,体积大于 20ul ,长片段需适当增加量。 
3. 电泳检测条带专一。

自备的引物

1. 浓度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,体积大于 20ul 。 
2. 随机引物和简并引物不能用于测序。 
3. 尽可能提供引物全序列、 PCR 退火温度

 

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