热电液相色谱是一类分离与分析技术,它的特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式。其中经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,固定相的粒度不能太小,液相色谱法是在经典色谱法的基础上,采用了气相色谱的理论,流动相改成高压输送,色谱柱是用小粒径的填料填充而成的,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
热电液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
液相以恒定的速率被泵入具有固定相的柱中。在进入色谱柱之前,分析样品被注入到载波中。到达色谱柱后,基于分析物分子和固定相之间的物理化学相互作用,样品组分被选择性保留。
流动相用于将样品输送至系统。流动相的基本标准是样品组分的惰性。通常使用纯溶剂或缓冲剂的组合。该流体不含颗粒杂质,并在使用前脱气。色谱柱是充满固定相的不锈钢管。这是一个重要的部分,应根据供应商的说明进行适当维护,以获得操作后的再现性和分离效率。
分析过程中的温度变化将导致分离出的洗脱组分的保留时间发生变化。柱温箱使用空气循环来保持恒定的柱温。这确保了流动相通过色谱柱的恒定流速。流动流速的变化会影响样品组分的洗脱时间,导致误差。该泵以恒定的压力向色谱柱提供恒定的流动相流量。
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