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公司动态

CY5-N-羟基琥珀酰亚胺酯, CY5-NHS ester 的操作说明

阅读:1988          发布时间:2018/8/2

Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推荐

 

分子式:C37H43N3O10S2

分子量:753.88

溶解性:溶于水;DMSO

EX激发波长:646 nm

EM发射波长:664nm

用途:花菁染料Cy5,常被应用于生物分子标记,荧光成像及其他荧光生物分析。他们广泛应用于多肽,蛋白,核苷酸等。Cy5染料具有增强荧光结合后的蛋白质。

储存条件:避光 -20°C避光

供应商:西安凯新生物科技有限公司

 

使用方法推荐:(仅供参考)

水溶性Cy5 NHS标记 (D-ser2)-leucineenkephalin

1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 μL DMSO后,加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine-enkephalin acetate ( 0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)

2. 然后加入15 μL三乙胺,常温避光搅拌反应混合物过夜。

3. 用HPLC 纯化蛋白,使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm),每次上样注入2×400 μL,30分钟梯度洗脱

从0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1% TFA)=70∶30,流速4mL /min。(对不同的蛋白选择不同的合适HPLC梯度流动相)

4. 收集适当的色带峰,标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5. 产品冷冻干燥成粉末或在水溶液中,-20℃避光储存;必要时可用质谱表征。

6.CyDye标记的蛋白稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4 ℃可避光保存2月;

更长期的保存需加入等体积的甘油-20 ℃避光保存。

F/P计算:

Cy5 在650 nm 的摩尔吸光系数为250 000 M-1 cm-1 ,所用蛋白在280 nm处的摩尔吸光系数为 170000 M-1 cm-1;

Cy5在280nm处的吸收是650nm处的5%。按以下公式计算F/P值。

[Cy5 dye] = (A650)/250 000

[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000

F/P final= [dye]/[peptide]= {0.68×A650}/ {A280 - (0.05×A650)}

 

西安凯新生物科技有限公司产品目录价格表:

n-琥珀酰亚胺脂dye nhs esters
  cyanine3 nhs ester
  cyanine3.5 nhs ester
  cyanine5 nhs ester
  cyanine5.5 nhs ester
  cyanine7 nhs ester
  cyanine7.5 nhs ester
  sulfo-cyanine3 nhs ester
  sulfo-cyanine5 nhs ester
  sulfo-cyanine5 bis-nhs ester
  sulfo-cyanine7 nhs ester 

 

炔烃 dye alkynes
  cyanine3 alkyne
  cyanine5 alkyne
  cyanine5.5 alkyne
  cyanine7 alkyne
  cyanine7.5 alkyne
  sulfo-cyanine3 alkyne
  sulfo-cyanine5 alkyne
  
  叠氮化物 dye azides
  cyanine3 azide
  cyanine3.5 azide
  cyanine5 azide
  cyanine5.5 azide
  cyanine7 azide
  cyanine7.5 azide
  sulfo-cyanine3 azide
  sulfo-cyanine5 azide
  sulfo-cyanine7 azide
 

马来酰亚胺 dye maleimides
  cyanine3 maleimide
  cyanine5 maleimide
  cyanine5.5 maleimide
  cyanine7 maleimide
  cyanine7.5 maleimide
  sulfo-cyanine3 maleimide
  sulfo-cyanine5 maleimide
  
  伯胺 primary amine
  cyanine3 amine
  cyanine5 amine
  cyanine5.5 amine
  cyanine7 amine
  cyanine7.5 amine
  sulfo-cyanine5 amine
  sulfo-cyanine7 amine
  
  马来酰亚胺 dye maleimides
  cyanine3 maleimide
  cyanine5 maleimide
  cyanine7 maleimide
  sulfo-cyanine3 maleimide
  sulfo-cyanine5 maleimide
  
  羧酸 carboxylic acids
  cyanine3 carboxylic acid
  cyanine5 carboxylic acid
  cyanine7 carboxylic acid
  sulfo-cyanine3 carboxylic acid
  sulfo-cyanine5 carboxylic acid
  sulfo-cyanine7 carboxylic acid 

供应商:西安凯新生物科技有限公司

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