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掌握这些知识，可以更加熟练的操作离心超滤管
发布时间：2019/12/9
掌握这些知识，可以更加熟练的操作离心超滤管
离心超滤管顾名思义，是可以进行超滤的离心管子。具有较低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。应用广，包括生物样品浓缩：包括抗原、抗体、酶、核酸或微生物；组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组分的纯化；对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩；脱盐和缓冲液更换。
离心超滤管的操作步骤：
1.匀浆处理：
a.组织将组织在液氮中磨碎加入试剂，用匀浆仪进行匀浆处理。
b.单层培养细胞直接在培养板中加入试剂裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。试剂用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心超滤管得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
离心超滤管的使用注意事项：
（1）试剂不能与手接触。
（2）要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，方可取用另一种试剂。
（3）试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将离心超滤管放回原处。
（4）已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。