您好, 欢迎来到制药网
支原体试剂盒的6大操作步骤
发布时间：2020/7/22
支原体试剂盒是用于在培养细胞中原位染色检测支原体或其它原核生物的试剂盒，主要用于检测培养细胞中是否存在支原体污染。
操作步骤：
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中，接种密度为1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。
2.5天后，先吸去培养液，再加入1ml的固定液，静置20min。
3.吸去固定液，晾干。
4.37℃避光放置15-20min或室温静置20～30min。
5.加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
培养细胞中的细菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光学显微镜下可见，但支原体污染在光学显微镜下不可见，必须通过特定的检测方法进行检测。
检测支原体污染的方法有很多种，包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、RT-PCR检测以及DNA荧光染色检测。上述检测方法中，除DNA荧光染色检测外操作步骤相对比较烦琐并且所需时间较长。支原体试剂盒是通过染色来检测支原体的，本试剂盒的荧光染色可快速、有效、高灵敏度地检测支原体污染。