您好, 欢迎来到制药网
使用离心超滤管时要注意以下事项
阅读：1225 发布时间：2021/11/16
离心超滤管，备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用。
使用注意事项：
(1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
(2)新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量*过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
(3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
(4)当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作，防止蛋白受热)，直到所有浓缩液都加完为止。
(5)前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤)，再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定。
以上就是关于离心超滤管的有关知识，希望能对您有所帮助。