药品包装微生物侵入是一种破坏性的定性测量方法,可用于判断无孔、刚性或柔性药品包装中的泄漏试验。在美国药典USP1207在2013年第一次以药典法规形式明确要求中明确提到微生物侵入法密封性研究。国家药品监督管理局药品审评中心( CDE) 在 2020 年发布的《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求》也提到了微生物侵入法。
这里介绍微生物侵入密封性研究主要关注点以及试验过程。
1.选用无泄漏的阴性包装和3μm、5μm、10μm的阳性样品，以及缺陷样品(大漏样品)
2. 培养基配制：配制将胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养基,测定pH值(应在7.3±0.2)。
3. 培养基促生长实验：将培养基灌装入已灭菌的阴性样品，预培养14天(30°C~35°C)后，接种入挑战菌悬液100μl，30°C~35°C培养7天或至所有样品均呈阳性结果。
4. 样品制备：将培养基灌入阴性、阳性、缺陷样品中。置于恒温培养箱中30°C~35°C培养14天，若培养基澄清则可进行后续微生物侵入试验。
5. 样品侵入济南新准仪器生产ZFY-01泄漏与密封强度测试仪的密封罐内，罐内存放挑战菌菌悬液二代缺陷短波单胞菌，压力设置为-30kpa、+10kpa(压力条件的设置要根据生产地和使用地海拔选择)，侵入结束后从菌悬液中取出样品，擦干试样外残留的菌悬液，置于恒温培养箱中30°C~35°C培养7天，观察检查每组试样中微生物的生长情况。如果发现有微生物生长情况，需确认生长菌是否为缺陷短波单胞菌。有生长的记为+，未生长的记为-。
6. 结果确认对培养后的样品生长情况进行确认，统计。
需要说明的是，微生物侵入试验需要在专用的实验室内完成，防止微生物的外泄。温度的控制、菌种的选择、测试的过程都会影响药品包装微生物侵入密封性研究的成败。
