人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒实验目的

　　人25羟基维生素D(25-OH-D)ELISA试剂盒实验目的

　　本试剂仅供研究使用

　　目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中25羟基维生素D(25-OH-D)的含量。

　　实验原理：

　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人25羟基维生素D(25-OH-D)水平。用纯化的抗D(25-OH-D)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人25羟基维生素D(25-OH-D)，再与HRP标记的25-OH-D抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的25羟基维生素D(25-OH-D)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人25羟基维生素D(25-OH-D)浓度。

　　2-8℃保存

　　计算：

　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　试剂盒性能：

　　1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

　　2.批内与批见应分别小于9%和11%

　　保存条件及有效期：

　　1.试剂盒保存：;2-8℃。

　　2.有效期：6个月

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