大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南：

　　BS-3471 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法：用纯化的大鼠sLR抗体包被微孔板形成固相抗体，依次加入样本、HRP标记的抗体，形成复合物后通过TMB显色，颜色深度与样本中sLR浓度正相关。

　　二、试剂盒组成

　　预包被微孔板‌：含固相抗体

　　标准品‌：浓度梯度通常为80、40、20、10、5、2.5 U/L

　　检测抗体‌：HRP标记的sLR抗体

　　显色底物‌：TMB溶液

　　终止液‌：酸性溶液(如2M H₂SO₄)

　　洗涤缓冲液‌：PBS或TBS配方

　　三、样本处理要求

　　样本类型‌：血清、血浆(肝素/EDTA抗凝)、组织匀浆液

　　采集注意事项‌：

　　避免溶血，室温血液凝固10-20分钟后离心(2000-3000 rpm，20分钟)

　　长期保存需-20°C分装，避免反复冻融

　　稀释建议‌：通常按1:5~1:20稀释，高浓度样本需进一步稀释

　　四、实验步骤

　　加样‌：

　　每孔加入50μL标准品或样本，设双复孔

　　孵育‌：37°C温育1小时，洗涤3次

　　酶标抗体结合‌：加入HRP标记抗体，37°C孵育30分钟

　　显色‌：加入TMB底物避光反应15分钟

　　终止与检测‌：加终止液后15分钟内测450nm OD值

　　五、注意事项

　　质量控制‌：

　　每板需设空白孔、标准曲线孔和质控样本

　　标准曲线R²应≥0.99

　　操作规范‌：

　　避免底物接触金属器械，终止液有腐蚀性需防护

　　开封后未用完板条需密封干燥保存

　　数据计算‌：

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，用四参数拟合计算样本浓度

　　六、技术参数

　　检测范围‌：通常2.5-80 U/L

　　灵敏度‌：<1.0 U/L(不同品牌可能有差异)

　　批内/批间差‌：CV<10%

　　如需具体品牌(如天津本生、天正信达生物等)的差异说明，可进一步提供补充信息。

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