本生选购指南:如何选择PCR实验耗材?
关于其基因组的测序和信息分析,早在两年前就由华大基因、浙江大学和中国科学院的科学家团队共同合作完成。后续功能的验证主要包括PCR检测、ChIP、IP、IHC、IF、FISH等手段。而其中就简单的方式就是PCR验证,那关于PCR实验有哪些影响因素呢?
我们一般想到的可能是获取的DNA/RNA质量、反转录的效率、引物的特异性乃至DNA聚合酶的保真度、扩增长度等问题,但很少有人会想到耗材的选择,可能也会影响您的实验结果。那么关于PCR实验耗材我们改如何选择呢?
首先需要明确的是我们做的是哪种PCR实验。根据检测方法的不同,PCR实验分为普通PCR法和荧光定量PCR法,前者一般是终点PCR跑胶法测定,所以在选择耗材时需要关注的主要是耗材本身的导热性和密封性;而后者是实时检测荧光信号,除了导热性和密封性外,对透光性和避光性也有所要求。换句话而言,可以做荧光定量PCR的耗材一定可以来做普通PCR,反之,效果却会差很多!
确定好了实验类型,我们就可以选择耗材了,如前面所述,我们知道了密封性、导热性、透光性、避光性等因素是我们需要关注的,那为什么要关注这些呢?
一、密封性
密封性越好,产物的挥发越少,得到的产物就越多同时气溶胶的产生也越少,对于下一轮实验的污染也就越少,也就意味着假阳性的产生率越低。
二、导热性
导热性越好越均一,PCR的速度就越快,准确度也越高。
三、透光性
这主要是对于荧光定量而言,我们知道它是一种实时定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接关系到我们检测到的荧光信号多少,如果选择耗材透光性不足,本该检测到的信号检测不到,那就会造成我们对结果的误判。
四、避光性
这也是针对荧光定量而言的,同上面的因素,如果我们在整个实验过程中没注意避光,带有荧光的试剂过度被消耗,那*直接就会影响我们实验的扩增效率,导致不准确的结果产生。
PCR单管
采用的一次注塑成型技术,超薄设计,热传导快,视窗比平面低,不易被划擦,管子密封性更好,近乎零蒸发,减少了气溶胶的污染,*大程度避免了假阳性的产生。荧光系列,盖子高度透光,可适用于顶读与低读。
八联管(适用普通PCR)
低于平面的高透视窗设计,可以*大程度避免被划擦。100%进口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和稳定的不黏壁性,确保了样品处理和吸取时的精准度。
PCR板
不同于市面上其他厂家底部注塑的方式,注塑点是在板面上的孔与孔的交叉处,这样使得PCR板的管底与PCR仪的接触更好,同时采用纯度高达99.9%的聚丙烯,超薄设计、壁厚一致均匀的工艺使得热传导精确、控温准确、有效减少了实验循环时间。
RNasin 能够保护mRNA 的完整,有利于提高转录及翻译的效率,同时避免了使用有机化合物抑制剂可能带来的影响。
规格:30μl(40U/μl)
RNasin 是存在于人胎盘中的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂其本质是蛋白质,分子量为51,000 Da,等电点pH值为4.7。
RNasin能够特异地与RNase 以非共价键结合形成复合体从而使RNase 失活。RNasin在缓冲液为0-0.5M NaCl,pH5-8的条件下具有活性,pH7.8 时活性最高。
RNasin 能够保护mRNA 的完整,有利于提高转录及翻译的效率,同时避免了使用有机化合物抑制剂可能带来的影响。
产品特点:
RNasin 能够抑制真核生物的RNaseA、B、C 和人胎盘RNase 的活性。
该产品不抑制RNase H,S1核酸酶,SP6,T7 和T3RNA聚合酶,MV 或M-MLV 反转录酶,Taq DNA 聚合酶,
RNase T1,不影响后继的反转录及蛋白质翻译过程。
缓冲体系需要有1 mM DTT 存在,活性pH 范围宽广。
产品应用:
用在有潜在RNase 污染的地方。
在cDNA合成、体外转录系统、翻译系统中保护mRNA。
可以增加多核糖体的活性、产量;利于病毒的体外复制。
用于制备无RNase 的蛋白产品,如抗体。
本生选购指南:如何选择PCR实验耗材?本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。
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