鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书

运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
以下是鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书的相关产品：

β-防御素 β-DF β-Defensins 25 800 pg/mL 1
β-防御素1 HBD-1 β-Defensins 1 12.5 400 pg/mL 1
β-防御素2 HBD-2 β-Defensins 2 5 160 pg/mL 1
β-防御素3 HBD-3 β-Defensins 3 12.5 400 pg/mL 1
β干扰素 IFN-β Interferon β 0.25 8 ng/mL 0.1
β痕迹蛋白 BTP β-trace protein 3 96 mg/L 0.1
β-联蛋白 β-Catenin β-Catenin 20 640 pg/mL 1
β-内啡肽 β-EP Beta-Endorphin 1.25 40 pg/mL 0.1
β内酰胺酶 β-lactamase β-lactamase 3.75 120 U/L 0.1
β葡萄糖醛酸苷酶 βGD β-glucuronidase 0.75 24 U/L 0.1
β羟丁酸 β-HB β-hydroxybutyrate 15 480 μmol/L 1
β-微管蛋白 TUBB β-tubulin 3.75 120 pg/mL 0.1
β位淀粉样前体蛋白裂解酶1 BACE1 β-site APP-Cleaving Enzyme 1 0.25 8 ng/mL 0.1
β血小板球蛋白;β血栓环蛋白 β-TG β-Thromboglobulin 2 64 ng/mL 0.1
β血小板球蛋白;β血栓环蛋白 β-TG;NAP2 β-Thromboglobulin 2 64 ng/mL 0.1
γ氨基丁酸 GABA Gamma-aminobutyric acid 0.25 8 μmol/L 0.1
γ干扰素 IFN-γ Interferon γ 25 800 pg/mL 1
γ干扰素诱导单核因子 MIG;CXCL9 monokine induced by interferon-gamma 75 2400 pg/mL 10
γ干扰素诱导蛋白16 IFI16;p16 interferon-inducible protein 16 5 160 pg/mL 1
γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 γ-GCS γ-GCS 2.5 80 μmol/L 0.1
γ-谷氨酰转肽酶 γ-GT γ-glutamyl transpeptidase 2.5 80 IU/L 0.1

腺病毒通用PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
斑点气单胞菌PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
温和气单胞菌PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
气单胞菌通用PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
蜂房小甲虫PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
阿菲波菌属通用PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
非洲马瘟病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
放线共生放线杆菌PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
加州立克次体PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
牛赤羽病病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
类天花病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
粪产碱杆菌PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书狷羚疱疹病毒型PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
阿留申病病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒
奥尔帕瓦约病毒PCR检测试剂盒 PCR检测试剂盒

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。