我们根据移动方舱PCR实验室核酸操作流程来了解一下PCR实验室的各个区域的具体作用。
试剂准备区操作流程:
情况一:
1、试剂盒取出后室温解冻。
2、阳性对照、阴性对照,传递至标本制备区。
情况二:
1、试剂盒取出后室温解冻。
2、瞬时离心,涡旋混匀,瞬时离心。
3、根据标本量,参照说明书配制要求,配制反应液。
4、涡旋混匀,瞬时离心,分装至八连管内,加盖。
5、传递至标本制备区。
标本制备区操作流程:
1、生物安全柜内:采样管开盖加样。标本管拧紧管帽后,充分震荡混匀,瞬时离心;吸取标本至核酸提取板对应孔内。弱阳性质控、阴性质控,加入核酸提取板对应孔内。
2、核酸提取仪:提取核酸。
3、生物安全柜内:加核酸样本。取出核酸提取板,从对应的孔内吸取核酸样本;先吸取样本和阴性质控的核酸样本加入到反应液内,加盖,盖紧;然后吸取弱阳性质控的核酸样本加入到反应液内,加盖,盖紧。
4、盖紧八连管后,轻震混匀,瞬时离心,传递至扩增分析区。
扩增分析区操作流程:
1、荧光PCR仪:开机、预热、核对扩增程序
2、确认待扩增八连管:管盖扣紧、管内液面高度-致、管内无气泡。
3、上机扩增:八连管按照标号与PCR仪器设置编号-致,摆放,扩增。
4、判断结果:按照试剂盒说明书要求进行结果判读。
各个区域对实验室人员的防护要求是不一样的。试剂准备区、扩增分析区二级防护,标本制备区三级防护。
二级防护要求:着本区专用工作服,着本区专用工作鞋(或鞋套)。
三级防护要求:更衣室进行三级防护穿戴,缓冲区进行三级防护脱弃。
从防护登记要求可以看出移动方舱PCR实验室的样本制备区是具有较高传染性的。
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